国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

北京百奧創(chuàng)新科技有限公司

MLPA試驗(yàn)原理

時(shí)間:2024-8-12 閱讀:1359
分享:


MLPA技術(shù),即多重連接探針擴(kuò)增技術(shù),于2002年首先報(bào)道,是近幾年發(fā)展起來(lái)的一種針對(duì)待檢DNA序列進(jìn)行定性和半定量分析的新技術(shù)。該技術(shù)高效、特異,在一次反應(yīng)中可以檢測(cè)45個(gè)核苷酸序列拷貝數(shù)的改變,已經(jīng)應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域、多種疾病的研究。下面讓我們一起來(lái)看看MLPA技術(shù)的試驗(yàn)原理吧!

MLPA實(shí)驗(yàn)中,純化的樣本DNA被變性。后用MLPA探針寡核苷酸孵育過(guò)夜。每個(gè)MLPA探針都具有針對(duì)特定基因組序列的探針。每對(duì)MLPA探針包括兩條單鏈DNA:左側(cè)探針和右側(cè)探針寡核苷酸。簡(jiǎn)稱(chēng)分別是LPORPO。LPORPO包含PCR引物和DNA雜交序列。

image.png 

MLPA反應(yīng)中,左探針寡核苷酸(LPO)和右探針寡核苷酸(RPO)都與靶序列進(jìn)行雜交,之后使用連接酶連接兩部分探針。

image.png 

將雜交的探針寡核苷酸連接到鄰近的目標(biāo)序列。探針連接產(chǎn)物的數(shù)量是樣品中目標(biāo)序列數(shù)量的度量。連接反應(yīng)具有高度特異性,連接部位周?chē)?/span>沒(méi)有錯(cuò)配。

image.png 

使用單個(gè)通用引物對(duì)在多重PCR中擴(kuò)增連接的探針。只有連接的探針呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)增,使得不需要去除未連接和未連接的探針。

image.png 

再通過(guò)毛細(xì)管電泳進(jìn)行片段分離,通過(guò)MRC Holland分析軟件進(jìn)行分析得出結(jié)論。PCR產(chǎn)物裝載到毛細(xì)管電置上,按長(zhǎng)度分離。每個(gè)片段對(duì)應(yīng)一個(gè)特定的MLPA探針。

image.png 

MLPA結(jié)合了DNA探針雜交和PCR技術(shù),不僅可以用來(lái)檢測(cè)與疾病相關(guān)的CNV(?拷貝數(shù)變異)?,?例如遺傳性乳腺癌、?結(jié)腸癌、?杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良等,?還可以用于腫瘤中的CNV檢測(cè),?以優(yōu)化腫瘤分型。任何技術(shù)都有其優(yōu)缺點(diǎn)。

優(yōu)點(diǎn):

1、高效:一次反應(yīng)可以檢測(cè)45個(gè)靶序列拷貝數(shù)的改變。

2、特異:可以檢測(cè)點(diǎn)突變。

3、快速:一次實(shí)驗(yàn)可以在24小時(shí)內(nèi)完成。

4、簡(jiǎn)便:不同的試劑盒操作基本相同,容易掌握。

缺點(diǎn):

1、需要精確測(cè)量DNA的濃度,樣本容易被污染。

2、不能用于單個(gè)細(xì)胞的檢測(cè)。

3、MLPA用于檢測(cè)基因的缺失或重復(fù),不適合檢測(cè)未知的點(diǎn)突變類(lèi)型。

4、不能檢測(cè)染色體的平衡易位。


會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話 產(chǎn)品分類(lèi)
在線留言
长治市| 昭平县| 高阳县| 盐亭县| 邵东县| 竹山县| 灌南县| 云龙县| 浦县| 灵石县| 新晃| 桓台县| 湟源县| 常熟市| 梁河县| 中西区| 织金县| 兴海县| 保德县| 永年县| 滨州市| 栖霞市| 仁化县| 肇庆市| 仙桃市| 仁怀市| 龙山县| 淮北市| 凤台县| 来安县| 佛教| 承德县| 曲麻莱县| 桂林市| 佳木斯市| 册亨县| 灵丘县| 盐亭县| 镶黄旗| 连平县| 皮山县|