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技術(shù)文章

elisa試劑盒報(bào)價(jià)的處理方法是不一樣

閱讀:323          發(fā)布時(shí)間:2018-9-26

       elisa試劑盒報(bào)價(jià)洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),ELISA檢測(cè)試劑盒只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),ELISA試劑盒并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。

       ELISA實(shí)驗(yàn)成功的前提是樣本的正確處理加上實(shí)驗(yàn)途中正確的操作,正確的處理樣本是保證ELISA檢測(cè)的正確性和準(zhǔn)確性的*步。通常我們可用于ELISA檢測(cè)的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,不同類型的檢測(cè)樣本前期。正確的處理樣本是保證ELISA檢測(cè)的正確性和準(zhǔn)確性的*步,下面就簡(jiǎn)單介紹一下不同類型的樣本的處理方法。
1、ELISA試劑盒血清
       血清是zui常用于ELISA檢測(cè)試劑盒的一類樣本,處理也比較簡(jiǎn)單。
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃放置一晚,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
    采血過程中應(yīng)避免溶血,因?yàn)榧t細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測(cè)試劑盒中會(huì)有非特異性的顯色,而導(dǎo)致檢測(cè)的不準(zhǔn)確性。同時(shí)也應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測(cè)的假陽(yáng)性。
2、血漿
       用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本,標(biāo)本采集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,檢測(cè)時(shí)還應(yīng)仔細(xì)閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對(duì)抗凝劑有特殊要求。
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清
     取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

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