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技術(shù)文章

影響elisa試劑盒報價中非特異性顯色的緣由

閱讀:562          發(fā)布時間:2018-12-4

      影響elisa試劑盒報價中非特異性顯色的緣由許多,如試劑盒特異性、查驗標(biāo)本中含酶符號物的干擾物,操作進(jìn)程中的疑問。這篇文章就這一緣由作一簡明剖析,以便可以經(jīng)過以上方法把非特異顯色降至zui低極限,然后跋涉檢測的特異性,并得到更準(zhǔn)確、可靠的試驗作用。查驗標(biāo)本中富含酶符號物的干擾物包被物的純度。 

     在酶聯(lián)免疫測定尤其是直接ELISA中,試劑的特異性取決于運用抗原的純度。當(dāng)時由于技術(shù)條件的綁縛,包被用抗原或的純度不可以抵達(dá)100%,所以有些非特異性顯色不可避免,只能盡可以跋涉純度特異性。當(dāng)時運用的包被抗原一般為組成多肽抗原。 包被的效價具有高親和力和高特異性的包被抗體,是挑選試劑特異性的重要方面。

     外源性干擾物,常常因樣品搜集、貯存、處置不當(dāng)構(gòu)成如樣品溶血,被細(xì)菌污染,標(biāo)本凝集不全等。溶血標(biāo)本,紅細(xì)胞溶解分裂,釋放出血紅素構(gòu)成,而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物,以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可以會增加非特異性顯色。如有細(xì)菌污染,菌體中可以富含內(nèi)源性HRP,有國內(nèi)報道酶免HAg試劑檢測溶血標(biāo)本時可構(gòu)成假陽性。如在冰箱中保管過久,其間的IgG可發(fā)生聚合,在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。因而,血標(biāo)本在搜集處置時應(yīng)留神,在冰箱中保管不易過久。

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