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技術(shù)文章

原來ELISA試劑盒吸光度值衰減這樣處理就可以啦。

閱讀:1007          發(fā)布時(shí)間:2019-8-5

 根據(jù)比爾定律, 吸光度與試樣濃度成正比, 在不同的吸光度( Absorbance,Abs) 范圍內(nèi)測(cè)量, 可引起不同的誤差.分析工作者應(yīng)予高度重視.分析樣品濃度太低或濃度太高, 吸光度值超越了合適的范圍, 都不會(huì)得到滿意的結(jié)果.應(yīng)使被分析樣品的吸光度范圍控制在一個(gè)合理的范圍內(nèi).


   試樣濃度不能太低, 吸光度不能太小, 信號(hào)過小, 光度噪聲的影響較大,使儀器的信噪比下降, 被測(cè)試的試樣濃度下限增高和分析誤差增大, 如測(cè)試huang曲霉素, 因儀器的噪聲太大, 測(cè)試數(shù)據(jù)從0. 4Ab s 開始就超過1%的相對(duì)誤差.

原來ELISA試劑盒吸光度值衰減這樣處理就可以啦。

   其實(shí)具體的原因也很簡(jiǎn)單,有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好。一般情況下,終止反應(yīng)后OD值的下降前期不是很明顯。終止后,吸光度值是會(huì)隨著時(shí)間衰減,所以一般是加完終止液后立即測(cè),這樣比較準(zhǔn)。

再次分析12條顯示逐級(jí)遞減的原因看看是否是:
① 顯色時(shí)間調(diào)整,如果您現(xiàn)在的顯色時(shí)間是10MIN,那調(diào)整到30MIN,再加終止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn)。

② 終止液中加入少量甘油看下怎么樣。
ELISA試劑盒顯色時(shí)間是30分鐘,終止后要求在30分鐘內(nèi)檢測(cè),加入終止液后,在加入終止液后2到3分終內(nèi)檢測(cè),這是OD值相對(duì)比較高。擬合值能達(dá)到四個(gè)9。

  

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