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小鼠同型半胱氨酸(HA)ELISA試劑盒操作步驟

閱讀:311          發(fā)布時間:2021-11-17

小鼠同型半胱氨酸(HA)ELISA試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體

自噬相關蛋白4D抗體

自噬相關蛋白9A抗體

醛縮酶C抗體

谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體

三磷酸腺苷結合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體

三磷酸腺苷結合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體

?;o酶A脫氫酶長鏈抗體

?;o酶A脫氫酶中鏈抗體

酰基輔酶A脫氫酶短鏈抗體

過氧化物酶?;o酶A氧化酶1抗體

磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體

轉(zhuǎn)化生長因子β誘導蛋白3抗體(半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1)

有絲分裂激酶A/B/C抗體

蛋白酪氨酸激酶ATK抗體

長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體

過氧化物酶酰基輔酶A氧化酶2抗體

膽固醇?;D(zhuǎn)移酶1抗體

磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

磷酸化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體

磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體

磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體

磷酸化腎上腺素能受體β2抗體

APS抗體

激活素受體樣激酶1抗體

激活素A受體1B抗體

磷酸化雄激素受體抗體


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