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技術(shù)文章

人巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)elisa試劑盒操作步驟

閱讀:190          發(fā)布時間:2022-9-1

人巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)elisa試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

半乳糖凝集素14(GAL14)重組蛋白

半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白

半乳糖凝集素3(GAL3)重組蛋白

半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白

半乳糖凝集素7(GAL7)重組蛋白

半乳糖凝集素8(GAL8)重組蛋白

半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白

半乳糖凝集素9B(GAL9B)重組蛋白

半乳糖凝集素9C(GAL9C)重組蛋白

胞外5'-核苷酸酶(NT5E)重組蛋白

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白

苯酚磺基轉(zhuǎn)移酶(PST)重組蛋白

表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)重組蛋白

表皮生長因子(EGF)重組蛋白

表皮生長因子受體(EGFR)重組蛋白

丙氨酸氨肽酶(AAP)重組蛋白

丙酮酸激酶(PK)重組蛋白

丙酮酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白

丙酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)重組蛋白

波形蛋白(VIM)重組蛋白

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補體1抑制因子(C1INH)重組蛋白

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補體成分2(C2)重組蛋白


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