化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
?大鼠磷脂酶A2（PL-A2）ELISA免費代測試劑盒操作步驟
閱讀：156 發(fā)布時間：2023-7-19大鼠磷脂酶A2（PL-A2）ELISA免費代測試劑盒操作步驟：
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
miRNA尿素-PAGE上樣液（1.5 mL）
miRNA尿素-PAGE上樣液（10 mL）
三合一RNA上樣液（A型）
三合一RNA上樣液（B型）
核酸染料
SYBR Green Ⅱ核酸染料
超快核酸銀染試劑盒
電泳級SYBR Green I
電泳級耐熱型SYBR染料
綠如藍核酸染料（UV）（0.5 mL）
綠如藍核酸染料（UV）（1.5 mL）
綠如藍核酸染料（可見光型）
溴化乙錠干粉
溴化乙錠清除劑（EB清除劑）
溴化乙錠溶液（1.5 mL）
核酸分子量標準
DNA電泳分子量標準2（DNA marker）（300-5000 bp）
DNA電泳分子量標準2（DNA marker）（50-400 bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker,λDNA/HindIII）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker,φX174 DNA/HaeIII）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker,φX174 DNA/Hinc II）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（100-1500bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（100-2000bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（100-5000bp）