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公司動態(tài)

轉(zhuǎn)化細胞生長的條件

閱讀:196          發(fā)布時間:2018-2-7

轉(zhuǎn)化細胞在對數(shù)生長期中期快速分裂,且在適應(yīng)過程開始時,存活率大于90%。這一點至關(guān)重要。當細胞需傳代時,建議采用1:2或1:3的小傳代比例,以維持更高的細胞密度,同時提供隔絕期間可能有助于細胞的細胞生長因子。

當細胞適應(yīng)新的培養(yǎng)條件時,在增大細胞傳代密度。

細胞生長

如果在適應(yīng)過程中,細胞停止了生長,則需讓細胞有更多的時間來適應(yīng)培養(yǎng)基組合。例如,在方法1的階段4,向無血清培養(yǎng)基添加少量的血清(1-3%)。這樣有助于細胞更容易地適應(yīng)新的培養(yǎng)基。然后,在幾個過渡期內(nèi),緩慢地減少血清量,直至學清量為0。

懸浮培養(yǎng)物

一些公司的無血清培養(yǎng)基和無蛋白培養(yǎng)基不含血清中所發(fā)現(xiàn)的細胞貼壁因子。在一段過渡期內(nèi),貼壁細胞將開始離開表面,并成為懸浮細胞系開始生長。細胞也可能因適應(yīng)而發(fā)生形態(tài)變化。監(jiān)測細胞的生長速度,只要細胞能夠與新系統(tǒng)相融合,任何形態(tài)變化都不重要。

細胞叢

轉(zhuǎn)化細胞在適應(yīng)于無血清培養(yǎng)期間,細胞容易形成叢。傳代培養(yǎng)時,將叢輕輕折斷,使其分散開。將培養(yǎng)物從靜止細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)移到可旋轉(zhuǎn)錐形瓶內(nèi),這樣可能會有助于防止細胞叢的形成。
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