人真皮成纖維原代細胞公司正在銷售的產(chǎn)品：人原代真皮成纖維細胞 肝癌細胞HBV病毒株 英文名稱： HEPG2.2.15 RM1 大鼠肌肉成纖維樣細胞 1ml/T75 人平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL LTK- 小鼠缺胸腺激酶L細胞 人原代子宮頸上皮細胞

人真皮成纖維原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

人真皮成纖維細胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)，合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的人真皮成纖維細胞采用先蛋白酶消化、后蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人真皮成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

Promocell C-25110 Hepatocyte Growth MediumKIT, 肝細胞生長套裝 500ml  PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細胞裂解液   CTSV Others Human 人 Cathepsin V / Cathepsin L2 兔原代脊髓成纖維細胞 大鼠原代甲狀旁腺細胞

白介素8受體α(IL8Rα)重組蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)

FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白

VTCN1重組小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

IL1R2重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)試劑盒 ，英文名： MMP13 ELISA Kit

Mouse cathepsin K (cath-K) ELISA Kit 小鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒

RatvisfatinELISAKit 大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforF1+2(Rabbitprothrombinfragme1+2)ELISAKit兔原片段F1+2

細胞結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量試劑盒20次

Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit大鼠受體(M-AChR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠α半乳糖基抗原試劑盒   小鼠α半乳糖基抗原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠α半乳糖基抗原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α半乳糖基抗原試劑盒、小鼠α半乳糖基抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠αN已?；咸擒彰冈噭┖?span>   小鼠αN已?；咸擒彰冈噭┖?span>   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠αN已?；咸擒彰冈噭┖?，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠αN已?；咸擒彰冈噭┖?、小鼠αN已?；咸擒彰?span>eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒   小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒、小鼠αL巖藻糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒   小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人真皮成纖維原代細胞小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human membrane cofactor protein (MCP/CD46) ELISA Kit 人膜輔蛋白(MCP/CD46)試劑盒

Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISAKit 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRH試劑盒山羊促生長激素釋放激素(GHRH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量試劑盒20次

MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原

JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白  Protein

B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白

SELE Protein Human 重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)