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液相色譜儀柱子的使用有什么方法呢?

閱讀:1037        發(fā)布時(shí)間:2022-2-21

隨著國(guó)家對(duì)于生物科技的重視,現(xiàn)在很多的實(shí)驗(yàn)儀器也在不但的改進(jìn)和崛起,現(xiàn)在我們國(guó)家的實(shí)驗(yàn)儀器做的越來越好,就像液相色譜儀一樣,對(duì)于國(guó)產(chǎn)的液相色譜儀使用感受不比國(guó)外差,那么關(guān)于液相色譜儀柱子的是使用具有是社門面房方法呢?

色譜柱在使用前,更好進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是更佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。

1、流動(dòng)相的配制:

液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):

a、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長(zhǎng)時(shí)間保留在柱中)。

b、流動(dòng)相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。

c、流動(dòng)相的黏度要盡量小,以便在使用較長(zhǎng)的分析柱時(shí)能得到好的分離效果;同時(shí)降低柱壓降,延長(zhǎng)液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度)。

d、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)。如使用UV檢測(cè)器,更好使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制。

e、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。

f、在流動(dòng)相配制好后,一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè),還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

2、樣品的前處理:

a、更好使用流動(dòng)相溶解樣品。

b、使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。

c、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。

綜上所述給我們介紹了兩個(gè)關(guān)于液相色譜儀柱子的使用方法,希望上述的解說能夠大家有所幫助



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