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關(guān)于國產(chǎn)液相色譜柱的再生處理技巧
關(guān)于國產(chǎn)液相色譜柱的再生處理技巧
1.常規(guī)處理
硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱每一次用完后用低流速長時(shí)間的二氯甲烷或正己烷等溶劑沖洗；鍵合相硅膠色譜柱、離子交換色譜柱和凝膠色譜柱先用蒸餾水沖洗，再用甲醇沖洗，然后用甲醇與蒸餾水以一定比例混合的溶液沖洗后過夜。
對于已使用一段時(shí)間后柱效下降的色譜柱可按以下方法進(jìn)行再生。再生處理包括活化和凈化兩種。
硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱按下列順序沖洗：
3甲基戊烷或己烷-3氯乙烷-乙酸乙脂-丙酮-乙醇-水。
鍵合相硅膠柱：
蒸餾水-甲醇。
離子交換樹脂柱：
高濃度的NaCl溶液可使大部分樹脂再生，油脂等少數(shù)與樹脂緊密結(jié)合的物質(zhì)可用低濃度堿溶液沖洗，酸性有機(jī)物吸附在固定相的用低pH緩沖液沖洗，堿性有機(jī)物用高pH緩沖液沖洗，然后再用蒸餾水-甲醇-二氯甲烷-甲醇-蒸餾水沖洗。
凝膠色譜柱：
由于凝膠色譜柱是根據(jù)被分離物質(zhì)的分子量大小而分離物質(zhì)，通常用稀的氫氧化鈉或非離子型去垢劑沖洗可除去大部分的結(jié)合物質(zhì)，如果一些污染物仍然不能清除時(shí)，用24%或30%乙腈沖洗過夜可除去疏水蛋白，用30%-50%乙酸可除去親水蛋白，用蛋白水解酶處理可分解凝膠中剩余的痕量胃蛋白酶，然后再用蒸餾水-甲醇-蒸餾水沖洗。
已污染的國產(chǎn)液相色譜柱處理：
因保留強(qiáng)的物質(zhì)污染，流動(dòng)相或樣品中不溶物沉積于柱頭，可用下列方法洗滌：去除脂類可用四氫呋喃、乙腈或甲醇洗滌；去除蛋白質(zhì)可用乙腈、丙醇和1%3Cl乙酸進(jìn)行梯度洗脫；一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脫，同時(shí)反復(fù)注入100-200ml的四氫呋喃。