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高效液相色譜HPLC的操作流程
高效液相色譜HPLC的操作流程：
1.將已經(jīng)過濾并脫氣的流動相注入儲液罐；
2. 用流動相沖洗金屬過濾器，然后將過濾器浸入儲液罐的流動相中；
3. 將儲液罐放置在一定的高度，以避免由于搬運(yùn)和其他操作人員的移動而造成不必要的跌落。
4. 然后按以下順序依次啟動高效液相色譜儀：泵→檢測器→高效液相色譜軟件→按預(yù)先計劃的方法設(shè)置軟件參數(shù)，如分析時間、檢測波長、流速等。
5. 啟動泵，運(yùn)行5分鐘，主要是為了排除系統(tǒng)中的氣泡，結(jié)束后關(guān)閉所有排氣閥；
6. 然后按照預(yù)先計劃的速度，以固定的速率，如1mL/min左右，運(yùn)行流動相，走基線，直到基線平穩(wěn)，就可以在計算機(jī)軟件上進(jìn)行監(jiān)視；
7. 基線平穩(wěn)后，在軟件中設(shè)置樣品的運(yùn)行參數(shù)，如流速和分析時間等。分析時間會因樣品、流速、柱長等因素變化。
8. 參數(shù)設(shè)置完畢后，將固定體積的樣品溶液注入進(jìn)樣閥，然后在軟件中啟動注入命令，進(jìn)樣器中的樣品溶液就隨流動相進(jìn)入色譜柱；
9. 通過軟件監(jiān)視各項讀數(shù)，當(dāng)檢測器檢測到樣品所有峰值，停止運(yùn)行并設(shè)置新的進(jìn)樣。在下一個樣品分析前，建議留出5-10分鐘，待流動相通過色譜柱，以便清洗之前樣品的殘留物；確認(rèn)基線穩(wěn)定后，進(jìn)行下一次注射。
10. 分析結(jié)束后，先關(guān)閉檢測器，然后關(guān)閉泵，最后關(guān)閉軟件。