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國產液相色譜柱的正相柱及反相柱使用方法

閱讀:3363        發(fā)布時間:2018/4/11
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   國產液相色譜柱的分離作用是在填料與流動相之間進行的,液相色譜柱的分類是依據填料類型而定。
  正相柱:多以硅膠為柱填料。根據外型可分為無定型和球型兩種。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN,-NH2等官能團即所謂的鍵合相硅膠。
  反相柱:主要是以硅膠為基質,在其表面鍵合十八烷基官能團的非極性填料。也有無定型和球型之分。
  正相色譜柱的使用方法:
  1.新柱子可直接用流動相。推薦用正己烷-乙腈以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積,再根據流動相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速沖10倍柱體積,zui后換成流動相;
  2.正相使用時,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;流動相要*脫氣,并不得含有羰基化合物和過氧化物;
  3.任何時候更換流動相時都要確保新流動相與柱子原保存液可互溶。
  反相色譜柱的使用方法:
  1.先用正己烷-乙腈以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積,再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水沖柱子;
  2.以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉水溶液沖柱子,立即用水沖洗,再換成流動相;
  3.配制流動相時,應各組分分別量取,比例較小的組分要精密量取,需調pH值時要精密到0.1;
  4.反相條件下使用時,要特別注意控制pH值范圍,pH值越低越有發(fā)生水解的危險,流動相中水的比例越高當然也越有發(fā)生水解的危險。的pH范圍在pH 3-7;
  5.如果要使用的流動相中還含有緩沖鹽類,建議在用分析流動相之前,先用不含緩沖鹽的同比例流動相過渡,這樣可避免緩沖鹽在分析柱內的析出。

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