調(diào)節(jié)性T細胞（T-Reg細胞）是一種特殊的T細胞系，對控制自身耐受和炎癥反應至關(guān)重要。調(diào)節(jié)性T細胞對于調(diào)節(jié)免疫穩(wěn)態(tài)和抑制不同疾病環(huán)境中的免疫反應具有至關(guān)重要的作用，它能通過抑制CD4+輔助性T細胞和CD8+細胞毒性T細胞的激活和分化，對自體和腫瘤表達的抗原產(chǎn)生反應性。Treg細胞表達特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3，因而，CD4+CD25+Foxp3+被認為是Treg細胞的經(jīng)典標記組合。

但是問題來了，選什么亞型，選什么來源，選什么熒光？

說到這兒，想必大家都很想知道，CD4+CD25+FOXP3+Treg調(diào)節(jié)性T細胞檢測試劑盒（TregFlowEx Kit）#ED7417能否解決這一難題呢？

CD4+CD25+FOXP3+Treg調(diào)節(jié)性T細胞檢測試劑盒反應種屬：人；應用類型：流式細胞術(shù)，FC；原理： 用于流式細胞術(shù)檢測人外周血或臍帶血中的調(diào)節(jié)性T細胞Treg (CD4 + CD25 + FOXP3 +)的百分比。

CD4+CD25+FOXP3+Treg調(diào)節(jié)性T細胞檢測試劑盒組分：固定與裂解液、破膜劑、封閉緩沖液、CD4-FITC/CD25-PE抗體預混液，以及FOXP3-APC抗體。

實驗流程如下：

1.表面染色：

1.1在試管中添加10µl CD4 FITC/CD25 PE試劑。

1.2添加100µl人血。

1.3混合均勻，在冰箱（2−8℃）的黑暗中孵育10分鐘。

1.4（可選清洗）洗滌池，加入2mL冷PBS，在300 g下離心5分鐘，4℃。

1.5吸入上清液，立即進入細胞內(nèi)染色。

2.細胞內(nèi)染色

2.1加入1mL稀釋的冷固定和溶解液。

2.2混合并在冰箱（2−8℃）黑暗中孵育10分鐘。

2.3添加0.5mL滲透溶液。

2.4混合并在冰箱（2−8℃）黑暗中孵育10分鐘。

2.5在400 g條件下，4℃下將細胞離心5分鐘。（離心前，請勿在固定/燙發(fā)混合物中添加任何其他緩沖液）

2.6去除（脫蠟）上清液。

2.7添加50µL冷阻緩沖液。

2.8添加50µL冷PBS。

2.9混合并在冰箱（2−8℃）的黑暗中孵育5分鐘。

2.10加入5μl FoxP3 APC試劑。

2.11混合并在冰箱（2−8℃）的黑暗中孵育30分鐘。

2.12. 用2ml冷PBS沖洗細胞兩次，在400 g下離心5分鐘，4℃。吸入/脫出上清液。

2.13. 在PBS中加入300µl 1%甲醛，并將染色樣品存放在2−8℃下，直到流式細胞儀測定。4小時內(nèi)分析處理樣品。

結(jié)果展示：

使用TregFlowEx試劑盒中對人CD4陽性淋巴細胞進行流式細胞術(shù)多色染色。 Treg細胞（CD4 + CD25 + FOXP3 +）位于右上象限。

文章來源：艾美捷科技