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武漢艾美捷科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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Cytoskeleton丨艾美捷Rac/Cdc42激活劑II分析

時(shí)間:2022/3/10閱讀:162
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Cytoskeleton 艾美捷Rac和Cdc42激活劑(Cat.#CN02)可有效激活多種培養(yǎng)細(xì)胞中的Rac1、Rac2Rac3Cdc42。該試劑激活成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和造血細(xì)胞以及其他原代和永生細(xì)胞系中的RacCdc42蛋白。經(jīng)激活劑處理的細(xì)胞可接受多種檢測(cè)中的任何一種,這些檢測(cè)表明RacCdc42活性增加,包括膜皺褶和板層足(Rac)染色(Cat.#BK005和圖2)以及G-LISARacCdc42活性檢測(cè)™ ,通過G-LISA分析測(cè)量的Cdc42激活示例。EGFCN02中通過單位測(cè)量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化,因此100 ng EGFCN02的一個(gè)單位。

 

Cytoskeleton 覆蓋肌動(dòng)蛋白,微管蛋白,馬達(dá)蛋白,小G蛋白,細(xì)胞外基質(zhì),活細(xì)胞成像等相關(guān)領(lǐng)域,提供對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì),抗體,檢測(cè)與分析試劑盒

 

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Cytoskeleton/艾美捷Rac/Cdc42激活劑II用途包括:

1.Rac和Cdc42激活研究的陽性對(duì)照。

2.研究RacCdc42激活對(duì)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的影響。

3.研究Rac激活對(duì)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架重排的影響。

4.研究RacCdc42激活對(duì)其他信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的串?dāng)_的影響。

 

表皮細(xì)胞肌動(dòng)蛋白激酶(EGFⅡ)通過表皮肌動(dòng)蛋白激酶(CDCⅡ)刺激細(xì)胞膜生長(zhǎng)。瑞士3T3細(xì)胞在1-10分鐘內(nèi)發(fā)生的這種主要形態(tài)反應(yīng)已被證明是通過激活Rac介導(dǎo)的(1)。定量測(cè)定活性(GTP結(jié)合)小G蛋白數(shù)量的生化分析表明,RacCdc42都能通過EGF刺激快速激活(30-2分鐘內(nèi))(2,3)。EGF治療后的第二反應(yīng)是肌動(dòng)蛋白應(yīng)力纖維的形成,其通過激活Rho1)介導(dǎo)。EGF是研究Rho信號(hào)通路的有用工具,值得注意的是,EGF激活了其他幾個(gè)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,包括Ras/Raf/MAPK、JAK/STATPI3K/AKT,數(shù)據(jù)應(yīng)作相應(yīng)解釋。

 

References:

1)    Ridley A. et al. 1992. The small GTP-binding protein rac regulates growth factor-induced membrane ruffling. Cell 70,401-410.

2)    Tu S. et al. 2003. Epidermal growth factor-dependent regulation of Cdc42 is mediated by the Src tyrosine kinase. J. Biol. Chem. 278,49293-49300.

3)    Kim et al. 2008. Epidermal growth factor-induced enhancement of glioblatoma cell migration in 3D arises from an intrinsic increase in speed but an extrinsic matrix- and proteolysis-dependent increase in persistence. Mol Bio Cell. 19, 4249-4259.

 

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在1.0和1.5小時(shí),分別用0.0%10.0%的血清和1.0%16.0%的血清處理細(xì)胞(1.010.0,1.0,1.0,1.0,1.0,1.0,1.0,1.0,3,1.0,6,1.0,1.0,1.0,1.0,3,1.0,1,6,1,1,1,1。經(jīng)Cdc42 G-LISA處理的細(xì)胞裂解物™ (BK127)測(cè)定,并在490 nm處讀取OD。繪圖前,從這些樣本中減去“受控狀態(tài)"血清饑餓值(0.22)。在1.0單位/毫升時(shí),總激活率是1.5分鐘時(shí)對(duì)照狀態(tài)的2.05倍或105%。

 

Cytoskeleton/艾美捷 相關(guān)研究工具:

Rho Activator I   Cat#CN01-A

Rho Inhibitor I  Cat#CT01-A

Cdc42 G-LISA Activation Assay (Colorimetric Format) - 96 Assays  Cat#BK127

Rho Activator II  Cat#CN03-A

 

艾美捷科技是Cytoskeleton的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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