艾美捷肌動蛋白（牛心臟 muscle）采用Pardee和Spudich法從牛心肌中純化肌動蛋白。牛心臟肌動蛋白由84%的α心臟肌動蛋白和16%的α骨骼肌動蛋白亞型組成，分子量約為43 kDa。牛心臟肌動蛋白純度大于99%，以白色凍干粉末的形式提供。

艾美捷肌動蛋白（牛心臟 muscle）存儲和重建：

短暫離心以收集管底部的產(chǎn)品。凍干蛋白質(zhì)在4°C條件下干燥至<10%濕度時，可穩(wěn)定儲存6個月。應(yīng)使用100µl蒸餾水將蛋白質(zhì)重組至10 mg/ml。然后將蛋白質(zhì)置于以下緩沖液中：5 mM Tris-HCl pH 8.0、0.2 mM CaCl2、0.2 mM ATP、5%（w/v）蔗糖和1%（w/v）葡聚糖。然后將濃縮的蛋白質(zhì)等分為實驗量，在液氮中快速冷凍，并在-70°C下儲存。如果在-70°C下儲存，蛋白質(zhì)可穩(wěn)定6個月。對于工作濃度，應(yīng)使用添加0.2 mM ATP（Cat.#BSA01，見試劑清單）和0.5 mM DTT的通用肌動蛋白緩沖液（Cat.#BSA04）進一步稀釋蛋白質(zhì)。肌肉肌動蛋白是一種不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，應(yīng)小心處理。避免重復(fù)凍融循環(huán)。

蛋白質(zhì)純度通過12%聚丙烯酰胺凝膠上考馬斯藍染色蛋白質(zhì)的掃描密度測定來確定。發(fā)現(xiàn)心臟肌動蛋白的純度>99%（見圖1）。

圖1：心臟肌動蛋白純度測定。在12%SDS-PAGE系統(tǒng)中通過電泳分離100µg牛心臟肌動蛋白樣品（分子量約43 kDa），并用考馬斯藍染色。用精密紅色蛋白質(zhì)分析試劑（Cat.#ADV02）測定蛋白質(zhì)定量。Mark12分子量標記來自Invitrogen。

艾美捷肌動蛋白（牛心臟 muscle）生物活性測定：

心臟肌動蛋白的生物活性可以通過其在體外有效聚合成細絲并在降速分析中與未聚合成分分離的能力來確定。嚴格的質(zhì)量控制確保在該試驗中，90%以上的肌肉肌動蛋白可以聚合。

關(guān)于心臟肌動蛋白的建議：

1.在缺乏ATP、二價陽離子和二硫蘇糖醇（DTT）的情況下，單體肌動蛋白不穩(wěn)定

2.單體肌動蛋白將在>2 mM K+、Na+、和>0.05毫米Mg2+。

3.單體肌動蛋白在pH值低于6.5或高于pH值8.5時不穩(wěn)定。

4.聚合肌動蛋白比單體肌動蛋白更能抵抗不利條件。因此，肌動蛋白最好以聚合形式在4°C下儲存數(shù)周。如果薄膜的儲存時間超過24小時，建議添加抗菌劑，如0.05%

die氮化鈉或100 ug/ml氨芐西林和10µg/ml氯霉素。

5.將肌動蛋白在液氮中以10毫克/毫升的速度快速冷凍，以保持6個月的高生物活性。