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Worthington公司抗生物素蛋白的分子特征和應(yīng)用說明

時(shí)間:2022/9/2閱讀:347
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Worthington公司有關(guān)抗生物素蛋白歷史:

1916 年,貝特曼首先研究了生蛋清對(duì)動(dòng)物的毒性作用。1927 年,Boas 證明“蛋清損傷"是由白蛋白中的一種蛋白質(zhì)引起的。經(jīng)確定,這種蛋白質(zhì)與生物素結(jié)合形成“不可消化"復(fù)合物,不能從動(dòng)物腸道或微生物從周圍介質(zhì)中吸收(Boas 1924、Pennington等人1942、Woolley 和 Longsworth 1942 和 Hertz 1946 )。埃金 等人。首先分離出該蛋白質(zhì)并將其命名為抗生物素蛋白(Eakin等人1940a、和 1941)。

 

1963 年,Green 確定了抗生物素蛋白-生物素復(fù)合物 (10-15 M) 的解離常數(shù),表明該復(fù)合物在體外具有J高的穩(wěn)定性(Green 1963a,b)。在 1970 年代后期和 1980 年代初期,抗生物素蛋白-生物素復(fù)合物的復(fù)合物形成是生物化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)中的有用工具(Guesdon等人1979Bayer 和 Wilchek 1980 和 Hsu等人。1981)。雞親和素的序列由 DeLange 和 Huang 于 1971 年確定。 cDNA 由 Gope等人克隆并測(cè)序。1987 年,Wallén等人對(duì)基因 ( avd ) 進(jìn)行了克隆和測(cè)序。1995 年。

 

最近與抗生物素蛋白的研究發(fā)現(xiàn)其可用于多種癌癥治療(Lesch等人, 2010)。抗生物素蛋白及其衍生物繼續(xù)用于生物素化蛋白質(zhì)的分離(Bolivar等人2008),并且它已被納入檢測(cè)尿液和血清中生物素水平的試驗(yàn)中(Zarogiannis等人2007)。

 

抗生物素蛋白是一種糖蛋白,由四個(gè)相同的亞基組成。它是爬行動(dòng)物、兩棲動(dòng)物和鳥類蛋清的次要成分。在雞中,它在輸卵管中合成以響應(yīng)孕酮,并在與炎癥和組織損傷有關(guān)的幾種組織中合成(Elo等人1979 和 Gope等人1987)。它以高親和力結(jié)合維生素生物素,因此被認(rèn)為是對(duì)抗需要生物素的微生物的防御蛋白(Wallén等。1995)??股锼氐鞍自谂潴w和蛋白質(zhì)之間表現(xiàn)出已知的最高自然親和力(Livnah等人, 1993)。

 

Worthington公司抗生物素蛋白分子特征:

該蛋白質(zhì)含有一個(gè) 24 個(gè)殘基的信號(hào)肽。抗生物素蛋白基因 ( avd ) 由被三個(gè)內(nèi)含子分開的四個(gè)外顯子組成 (Wallén et al. 1995)。盡管親和素與鏈霉親和素具有幾乎相同的二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)結(jié)構(gòu),但這兩種蛋白質(zhì)僅顯示出 30% 的序列同一性,并且被認(rèn)為在進(jìn)化上不相關(guān)(Laitinen等, 2006)。

 

抗生物素蛋白是一種基本的同型四聚體糖蛋白(Green 1964,以及 DeLange 和 Huang 1971)。碳水化合物部分是一種由四種氨基葡萄糖和五種甘露糖組成的多糖,與每個(gè)亞基的 Asn-17 相連(DeLange 和 Huang 1971)。每個(gè)相同的亞基結(jié)合一個(gè)生物素分子,色氨酸參與非共價(jià)結(jié)合。每個(gè)亞基折疊成一個(gè)八股反平行β桶,顯示上下拓?fù)洹5取?span style="font-family: Calibri;">1998 年)。盡管親和素與另一種生物素結(jié)合蛋白鏈霉親和素具有幾乎相同的二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)結(jié)構(gòu),但鏈霉親和素沒有被糖基化并且不易聚集。與鏈霉親和素相比,抗生物素蛋白對(duì)非結(jié)合生物素的親和力更高,但對(duì)結(jié)合生物素的親和力較低(Laitinen等人, 2006 年)。

 

抗生物素蛋白制劑每毫克蛋白質(zhì)結(jié)合 15.1 µg D-生物素,相當(dāng)于每摩爾蛋白質(zhì)結(jié)合 摩爾生物素。生物素的解離常數(shù)約為 10 -15 M, 比典型的抗原-抗體相互作用高約 10 3 -10 6倍(Green 1963a 和 Nardone等人。1998 年)。生物素-抗生物素蛋白復(fù)合物依賴于介質(zhì)離子強(qiáng)度,但在較寬的 pH 范圍內(nèi)和對(duì)熱相對(duì)穩(wěn)定。

 

bi要實(shí)現(xiàn)游離生物素的可逆或不可逆變性。pH 1.5 的氯化胍 (6-8 M) 和 120°的高壓滅菌 (15 分鐘是充分解離條件的示例 (Green 1970a, b)。

 

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Worthington公司抗生物素蛋白的應(yīng)用說明:

1.生物素功能研究

2.生物素是輔酶的酶的研究

3.用于親和純化的抗生物素蛋白或抗生物素蛋白亞基(Berger 和 Wood 1975,以及 Green 和 Toms 1973

4.體內(nèi)靶向?qū)嶓w瘤

 

Worthington公司抗生物素蛋白參考文獻(xiàn)(部分):

Eakin, R., Snell, E., and Williams, R.: A Constituent of Raw Egg White Capable of Inactivating Biotin in Vitro, J Biol Chem 136, 801, 1940

Eakin, R., Snell, E., and Williams, R.: The Concentration and Assay of Avidin, the Injury-producing Protein in Raw Egg White, J Biol Chem 140, 535, 1941

Finn, F., Titus, G., Montibeller, J., and Hofman, K.: Hormone-Receptor Studies with Avidin and Biotinylinsulin-Avidin Complexes , J Biol Chem 255, 5742, 1980

Fraenkel-Conrat, H., Snell, N., and Ducay, E.: Avidin. I. Isolation and Characterization of the Protein and Nucleic Acid , Arch Biochem Biophys 39, 80, 1952

 

Worthington公司專注于生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington公司的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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