噬菌體T7 RNA聚合酶是一種DNA依賴性RNA多聚酶（99kDa），對(duì)含有T7噬菌體啟動(dòng)子的DNA序列的體外RNA合成進(jìn)行催化。高濃縮版T7 RNA聚合酶HC非常適合建立和優(yōu)化高產(chǎn)量的體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。所提供的T7 IVT設(shè)置緩沖液、MgCl2和DTT溶液能夠測(cè)試不同的反應(yīng)條件，例如核苷酸/MgCl2濃度。

艾美捷T7 RNA聚合酶化學(xué)性質(zhì)：

僅供體外使用！

運(yùn)輸：凝膠包裝運(yùn)輸

儲(chǔ)存條件：-20°C儲(chǔ)存

避免凍融循環(huán)

保質(zhì)期：12個(gè)月

純度：≥ 95%（SDS-PAGE）

形式：液體

濃度：2.0–2.2μg/μl（T7 RNA聚合酶HC儲(chǔ)存緩沖液中的A280，?=140 l mmol-1 cm-1[1]）

J小優(yōu)化的分析設(shè)置建議：HighYield T7 RNA合成試劑盒（#RNT-101）。

活性：1μl T7 RNA聚合酶HC在37°下10分鐘內(nèi)產(chǎn)生>/=30μg RNA。這相當(dāng)于1000 U NEB的T7 RNA聚合酶（高濃度），#M0460T（活性測(cè)定條件：1x T7 IVT建立緩沖液，補(bǔ)充10 mM DTT、12 mM MgCl2、3 mM NTPs、1μl T7 RNA聚合酶HC和1μg DNA模板（1.4 kpb RNA轉(zhuǎn)錄物），20μl。用熒光微板測(cè)定法測(cè)定RNA產(chǎn)量。）

艾美捷T7 RNA聚合酶包含：

T7 RNA Polymerase HC

1x 50 μl (2 μg/μl)

50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 100 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.1 % Triton-X-100, 50 % Glycerol (v/v), pH 8.0

T7 IVT Set-up Buffer

1x 200 μl (10x)

400 mM Tris-HCl (pH 8.0), 20 mM Spermidin

DTT

1x 100 μl (100 mM)

MgCl2

1x 200 μl (200 mM)

艾美捷T7 RNA聚合酶相關(guān)研究：

HighYield T7 RNA Synthesis Kit, #RNT-101

RNAse Inhibitor - recombinant, #PCR-392

NTP bundle, #NU-1014

文獻(xiàn)參考：

[1] King et al. (1986) Transcription by T7 RNA Polymerase Is Not Zinc-Dependent and Is Abolished on Amidomethylation of Cysteine-347. Biochemistry25(1):37.