在體外定量和監(jiān)測細胞內(nèi)組織蛋白酶-B活性。本試驗中的魔力紅底物在被活性組織蛋白酶切割時發(fā)出紅色熒光。使用熒光顯微鏡或熒光板讀取器分析熒光信號。

血清或細胞外基質(zhì)中組織蛋白酶活性升高可表示多種病理狀況。艾美捷ICT魔力紅組織蛋白酶B活性分析試劑盒被研究人員用來定量和監(jiān)測培養(yǎng)細胞和組織中的組織蛋白酶活性。

該試劑盒檢測組織蛋白酶B活性。要使用魔力紅，將基質(zhì)直接添加到細胞培養(yǎng)基中，孵育并分析。因為它是細胞滲透性的，它很容易穿透細胞膜和內(nèi)部細胞器的膜——不需要裂解或滲透步驟。如果組織蛋白酶是活性的，魔紅底物被裂解，甲酰紫熒光團將在激發(fā)時變?yōu)闊晒?。隨著酶活性的進展和更多魔紅底物的裂解，信號將增強，使研究人員能夠觀察顏色隨時間的變化。樣品可通過熒光顯微鏡或熒光板讀取器進行分析。試劑盒中包括Hoechst 33342和吖啶橙，分別用于檢測核形態(tài)和溶酶體細胞器結(jié)構(gòu)。

艾美捷ICT 魔力紅組織蛋白酶B活性分析試劑盒參數(shù)：

試劑名稱MR-RR2

靶向組織蛋白酶B

激發(fā)/發(fā)射592 nm/628 nm

熒光板讀數(shù)器、熒光顯微鏡的分析方法

樣品類型細胞培養(yǎng)

儲存2-8°C

艾美捷ICT 魔力紅組織蛋白酶B活性分析試劑盒組分：

Kit 937: 25 Tests

Magic Red Substrate (MR-RR2), 1 25 Test Vial, #6133

Hoechst 33342, 1 mL, #639

Acridine Orange, 0.5 mL, #6130

Kit Manual

Kit 938: 100 Tests

Magic Red Substrate (MR-RR2), 1 100 Test Vial, #6134

Hoechst 33342, 1 mL, #639

Acridine Orange, 0.5 mL, #6130

Kit Manual

魔力紅組織蛋白酶B活性分析試劑盒部分文獻參考：

Hao, W;Dian, M;Zhou, Y;Zhong, Q;Pang, W;Li, Z;Zhao, Y;Ma, J;Lin, X;Luo, R;Li, Y;Jia, J;Shen, H;Huang, S;Dai, G;Wang, J;Sun, Y;Xiao, D. Autophagy induction promoted by m6A reader YTHDF3 through translation upregulation of FOXO3 mRNA. Nature communications. 2022 October 4; doi: 10.1038/s41467-022-32963-0. Article

Li, Y;Xu, B;Ren, X;Wang, L;Xu, Y;Zhao, Y;Yang, C;Yuan, C;Li, H;Tong, X;Wang, Y;Du, J. Inhibition of CISD2 promotes ferroptosis through ferritinophagy-mediated ferritin turnover and regulation of p62-Keap1-NRF2 pathway. Cellular & molecular biology letters. 2022 September 30; doi: 10.1186/s11658-022-00383-z. Full Abstract

Iyer, H;Shen, K;Meireles, AM;Talbot, WS. A lysosomal regulatory circuit essential for the development and function of microglia. Science Advances. 2022 September 2; doi: 10.1126/sciadv.abp8321. Abstract