您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
人乳鐵蛋白(LTF)ELISA試劑盒操作注意事項:
1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品
6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
人乳鐵蛋白(LTF)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1.血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆
3.細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人乳鐵蛋白(LTF)ELISA試劑盒操作步驟:
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
艾美捷Kamiya人乳鐵蛋白ELISA是一種高度靈敏的雙位點酶聯(lián)免疫測定(ELISA)人類生物樣品中乳鐵蛋白的測定。僅供研究使用。不用于診斷程序。
艾美捷Kamiya人乳鐵蛋白ELISA試劑盒試劑制備校準儀:
將1.0 ml蒸餾水或去離子水加入凍干人乳鐵蛋白校準儀中,并輕輕混合直至溶解。校準器現(xiàn)在的濃度為18.40µg/mL(重新配制的校準器應(yīng)為如果打算將來使用,則立即冷凍)。需要準備人乳鐵蛋白校準品使用前立即(見下表)。在每一步之間充分混合。避免起泡。
艾美捷Kamiya人乳鐵蛋白ELISA試劑盒化驗規(guī)程:
樣品的稀釋:
由于測定的高靈敏度,在用于正常測定之前,應(yīng)稀釋每個樣品。A 1:20血清或血漿稀釋適用于大多數(shù)樣本,而母乳樣本可能需要稀釋1:50000。
對于產(chǎn)生校準曲線范圍外結(jié)果的樣品的絕對定量,取較小值或較大值可能需要稀釋。如果不確定樣品水平,則在之前用一個或兩個代表性樣品進行連續(xù)稀釋強烈建議運行整個板。
為了制備1:20稀釋的樣品,將20µL樣品轉(zhuǎn)移到380µL 1X稀釋劑中。這樣可以得到1:20的稀釋度?;旌戏浅橹苽?span style="font-family: Calibri;">1:50000稀釋的樣品,將5µL樣品轉(zhuǎn)移至495µL 1X稀釋劑中。這給你一個1: 100稀釋。充分混合。然后,將2µL的1X稀釋劑轉(zhuǎn)移至998µL,稀釋1:100的樣品。對樣品進行1:50000稀釋。在每個階段充分混合。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,化工儀器網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。