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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>115-035-003艾美捷HRP標(biāo)記親和純化山羊抗小鼠
HRP(Horseradish Peroxidase,辣根過(guò)氧化物酶)是一種分子量達(dá)44000的糖蛋白,由無(wú)色的酶蛋白和深棕色的鐵卟啉結(jié)合而成,通常來(lái)源于辣根植物中,是臨床檢驗(yàn)試劑中的常用酶。辣根過(guò)氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)比活性高,穩(wěn)定,分子量小,純酶容易制備,所以很常用。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無(wú)色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋 白,糖含量18%。由于其易于提取、價(jià)格相對(duì)低廉,同時(shí)性質(zhì)穩(wěn)定,耐熱及有機(jī)溶劑的作用,與抗原或抗體偶聯(lián)后,活性很少受損失,因此是迄今為止在免疫學(xué)中應(yīng)用最為廣泛的一種標(biāo)記用酶。HRP的催化底物包括色原底物、化學(xué)發(fā)光底物等,其中極為常用的色原底物有OPD、2,2’-吖嗪-ABTS、TMB和4-氨基安替比林:苯酚耦聯(lián)底物對(duì)等;而化學(xué)發(fā)光底物則包括Luminol/增強(qiáng)劑等系統(tǒng)。
艾美捷115-035-003辣根過(guò)氧化物酶HRP標(biāo)記親和純化山羊抗小鼠IgG(H+L)二抗背景:
基于免疫電泳和/或ELISA,抗體與全分子小鼠IgG反應(yīng)。它還與其他小鼠免疫球蛋白的輕鏈反應(yīng)。未檢測(cè)到針對(duì)非免疫球蛋白血清蛋白的抗體。該抗體可能與其他物種的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。
通過(guò)免疫親和層析從抗血清中分離出完整的IgG抗體。它們具有通過(guò)二硫鍵連接在一起的Fc部分和兩個(gè)抗原結(jié)合Fab部分,因此它們是二價(jià)的。據(jù)報(bào)道,平均分子量約為160kDa。整個(gè)IgG形式的抗體適用于大多數(shù)免疫檢測(cè)程序,極-具成本效益。
艾美捷115-035-003辣根過(guò)氧化物酶HRP標(biāo)記親和純化山羊抗小鼠IgG(H+L)基本參數(shù):
目標(biāo):鼠
宿主:山羊
抗體形式:全IgG
特異性:IgG(H+L)
標(biāo)記物:辣根過(guò)氧化物酶
類別:全IgG親和純化抗體
克隆性:多克隆
物理狀態(tài):凍干固體
儲(chǔ)存和再水合:在2-8°C下儲(chǔ)存凍干固體。用指-定體積的dH2O重新水合,如果不清楚,則進(jìn)行離心。使用當(dāng)天準(zhǔn)備工作稀釋液。在2-8°C下作為未稀釋液體穩(wěn)定約6周。
脫水后的長(zhǎng)期儲(chǔ)存:等分并在-70°C或更低溫度下冷凍。避免反復(fù)冷凍和解凍?;蛘?,添加等量的甘油(ACS級(jí)或更好),最終濃度為50%,并以液體形式儲(chǔ)存在-20°C。
純度:抗體通過(guò)免疫親和層析從抗血清中純化,使用偶聯(lián)到瓊脂糖珠的抗原。
緩沖液:0.01MNa3PO?,0.25M NaCl,pH 7.6
穩(wěn)定劑:15 mg/ml牛血清白蛋白(無(wú)IgG,無(wú)蛋白酶)
防腐劑:無(wú)
建議工作濃度或稀釋范圍:
1: 500-1:5000用于免疫組織/細(xì)胞化學(xué)
1: 5000-1:100000用于ELISA和顯色底物的蛋白質(zhì)印跡
1: 10000-1:200000用于ECL底物的蛋白質(zhì)印跡
稀釋因子以范圍的形式表示,因?yàn)?/span>合適的稀釋是許多因素的函數(shù),如抗原密度、滲透性等。實(shí)際使用的稀釋必須根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定。
圖:在CC-by許可下,Lai,T.C.,Chen,Y.C。等人于2022年3月29日在部分Fiber Toxicol中發(fā)表了智人(人)中的蛋白質(zhì)印跡。
艾美捷115-035-003辣根過(guò)氧化物酶HRP標(biāo)記親和純化山羊抗小鼠IgG(H+L)引用文獻(xiàn):
1.A novel function for the sperm adhesion protein IZUMO1 in cell-cell fusion. J Cell Biol (2023)
2.DL-3-n-butylphthalide alleviates motor disturbance by suppressing ferroptosis in a rat model of Parkinson's disease. Neural Regen Res (2023)
3.Functional Assessment of Cancer-Linked Mutations in Sensitive Regions of Regulators of G Protein Signaling
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