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艾美捷質膜H+ATP酶應用實例和文獻參考

時間:2023/1/4閱讀:228
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質膜H+ATP酶是約100kDa的蛋白質家族,據(jù)信其不包括植物和真菌的質膜。該蛋白質錨定在生物膜內,其產生用作能源的電化學梯度,并且對于攝取大多數(shù)代謝物和植物對環(huán)境的響應(例如葉子的移動)是必需的。

 

艾美捷質膜H+ATP基本參數(shù):

中文名稱:H + ATPase |等離子膜H + ATPase(兔抗體)

英文名字:H+ATPase | Plasma membrane H+ATPase (rabbit antibody)

規(guī)格:50ul

應用類型:Immunofluorescence (IF), Immunolocalization (IL), Western blot (WB)

來源宿主:兔

免疫原:KLH標記合成肽,衍生自可用的di和單子葉植物,蕨類植物,苔蘚和藻類質膜ATPase格式:凍干

保存建議:在-20°C下儲存凍干/重構;一旦重構,制作等分試樣以避免反復的凍融循環(huán)。請記住,在打開管子之前先旋轉管子,以避免粘附在管子蓋子或側面的材料可能造成的任何損失。不要將此抗體儲存在4°C。

推薦稀釋度:1:600-1:1000IF),1:100IL),1:1000-1:10000WB

 

艾美捷質膜H+ATP應用實例

 

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2:質膜H+ATP酶在擬南芥根中的定位。擬南芥,延伸區(qū),H+ATP酶(綠色)。將擬南芥根在多聚甲醛中固定30分鐘。組織在免疫定位之前進行清潔??雇?/span>H+ATPase |質膜一抗稀釋于1:300和與Alexa 555偶聯(lián)的抗兔IgG二抗。與DAPI可視化核共染色(藍色)。比例尺–100μm。1:來自擬南芥(1),大麥(2),玉米(3),煙草質膜部分的20μg總蛋白,2.5μg4) ,用蛋白質提取緩沖液,PEBAS08 300,用35體積的均質緩沖液),在70°C下變性10分鐘,并在4-12%NuPageInvitrogenLDS-PAGE上分離,并印跡1hPVDF。在20mm Tris,137mm氯化鈉ph7.6,0.1%v/v)的封閉試劑中轉移后立即封閉斑點Tween-20TBS-T)在室溫下攪拌1小時。Blots在一級抗體中以1:5000的稀釋度在室溫下孵育1h溫度攪拌。傾析出抗體溶液并將印跡短暫沖洗兩次,然后洗滌一次15分鐘和3次在室溫下在TBS-T中攪拌5分鐘。用二級抗體(抗兔IgG辣根過氧化物酶)孵育小鼠偶聯(lián)的推薦二抗AS09 602)在2%封閉溶液中于室溫攪拌稀釋至1:20 000,持續(xù)1h。如上洗滌印跡,并根據(jù)制造商的說明用化學發(fā)光檢測試劑顯色5分鐘。使用CCD成像儀(FluorSMax,Bio-Rad)和Quantity One軟件(Bio-Rad)獲得印跡的圖像。曝光時間為2分鐘。

 

艾美捷質膜H+ATP文獻參考:

Michalopoulou et al. (2022) The host exocyst complex is targeted by a conserved bacterial type-III effector that promotes virulence. Plant Cell. 2022 May 30:koac162. doi: 10.1093/plcell/koac162. Epub ahead of print. PMID:35640532.

Hofmann, Wienkoop & Luthje (2022) Hypoxia-Induced Aquaporins and Regulation of Redox Homeostasis by a Trans-Plasma Membrane Electron Transport System in Maize Roots. Antioxidants (Basel). 2022 Apr 25;11(5):836. doi:10.3390/antiox11050836. PMID: 35624700; PMCID: PMC9137787.

Huang et al (2021). Parasitic modulation of host development by ubiquitin-independent protein degradation. Cell. 2021 Sep 30;184(20):5201-5214.e12. doi: 10.1016/j.cell.2021.08.029. Epub 2021 Sep 17. PMID: 34536345; PMCID: PMC8525514.

Lapshin et al. (2021) Sterol Extraction from Isolated Plant Plasma Membrane Vesicles Affects H+-ATPase Activity and H+-Transport. Biomolecules. 2021 Dec 16;11(12):1891. doi: 10.3390/biom11121891. PMID: 34944535; PMCID: PMC8699270.

Choi et al. (2021) Augmented CO2 tolerance by expressing a single H+-pump enables microalgal valorization of industrial flue gas. Nat Commun. 2021 Oct 18;12(1):6049. doi: 10.1038/s41467-021-26325-5. PMID: 34663809; PMCID: PMC8523702.


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