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因子X(FX)是一種參與血液的血漿絲氨酸蛋白酶酶原凝結(jié)級(jí)聯(lián)。因子X從血漿中純化為雙鏈蛋白由45kDa重鏈和17kDa輕鏈組成。因子X重鏈在凝固過程中被幾種不同的蛋白酶裂解,包括固有的Xase復(fù)合物羅素蝰蛇毒液(RVV)和胰蛋白酶,以及外源性(組織因子/因子VIIa)途徑產(chǎn)生活性因子Xa酶。因子Xa,如凝血酶原的激活劑,占據(jù)連接兩種血液的中心位置凝血途徑 。
Nordic BioSite艾美捷人因子X ELISA(KSP-134)檢測(cè)原理:
人因子X ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒設(shè)計(jì)用于檢測(cè)人血漿、血清、牛奶、尿液、唾液中的因子X,CSF和細(xì)胞培養(yǎng)樣品。該分析采用定量夾心法酶免疫分析技術(shù),在大約
4小時(shí)。一種針對(duì)人因子X的單克隆抗體已經(jīng)預(yù)先包被在具有可移除條的96孔微孔板上。標(biāo)準(zhǔn)中的系數(shù)X和樣品被固定化抗體和生物素化人因子X特異性多克隆抗體鏈霉親和素過氧化物酶(SP)綴合物。所有未結(jié)合的材料都被沖走并加入過氧化物酶底物。顏色顯影停止并且測(cè)量顏色的強(qiáng)度。
Nordic BioSite人因子X ELISA(KSP-134)組分:
儲(chǔ)存條件:
•到達(dá)后,立即將套件組件存放在建議的位置截至到期日的溫度。
•將SP綴合物和生物素化抗體儲(chǔ)存在-20°C。
•儲(chǔ)存微孔板、濃縮稀釋劑(10x)、洗滌緩沖液、停止2-8°C下的溶液和染色基質(zhì)。
•未使用的微孔板孔可與干燥劑包裝并重新密封??稍谡婵崭稍锲?。
•用稀釋劑重新配制前,將標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存在2-8°C,-20°C用稀釋劑重建后。
Nordic BioSite人因子X ELISA(KSP-134)試劑準(zhǔn)備:
•新鮮稀釋所有試劑并使所有試劑達(dá)到室溫使用前。
•MIX稀釋濃縮液(10倍):稀釋MIX稀釋稀釋濃縮液10-用試劑級(jí)水折疊以產(chǎn)生1x溶液。稀釋濃縮,確保徹-底沖洗瓶子以提取任何沉淀留在瓶中。輕輕混合1x溶液,直到結(jié)晶已完-全溶解。在2-8°C下儲(chǔ)存30天。
•人因X標(biāo)準(zhǔn):重組人因X的標(biāo)準(zhǔn)(65 ng,7.8 mIU)與1.3 ml MIX稀釋劑混合,生成50 ng/ml(6
mIU/ml)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。讓小瓶靜置10分鐘在稀釋之前輕輕攪拌。準(zhǔn)備兩份或三份通過從標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(50ng/ml)與等體積的MIX稀釋劑混合2倍,6.25、3.125、1.563和0.781 ng/ml溶液。MIX稀釋劑用作零標(biāo)準(zhǔn)(0ng/ml)。應(yīng)儲(chǔ)存任何剩余的儲(chǔ)備溶液-20°C,30天內(nèi)使用。避免重復(fù)凍融循環(huán)
•生物素化人因子X抗體(100x):并稀釋所需量的抗體100-用MIX稀釋劑折疊以產(chǎn)生1x溶液。未稀釋的抗體應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C。
•洗滌緩沖液濃縮液(20x):稀釋洗滌緩沖液用試劑級(jí)水稀釋20倍以產(chǎn)生1x溶液。什么時(shí)候稀釋濃縮液,確保徹-底沖洗瓶子提取瓶中殘留的沉淀物。輕輕混合1x溶液,直到晶體完-全溶解。
•SP共軛物(100x):短暫降速SP共軛物并稀釋將所需量的綴合物用MIX稀釋劑稀釋100倍產(chǎn)生1x溶液。未稀釋的抗體應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C。
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