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鈣調(diào)蛋白研究:作用機(jī)理及BML-SE325-0001生物活性

時(shí)間:2023/4/13閱讀:298
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Ebashi 等在 1965 年報(bào)道了細(xì)胞中存在介導(dǎo)鈣信號(hào)的鈣結(jié)合蛋白,隨后 Cheung 將這一類能結(jié)合鈣離子的磷酸二酯酶(PDE)激活蛋白命名為“鈣調(diào)蛋白"(calmodulin,簡(jiǎn)稱 CaM)。 [4]

 

鈣調(diào)蛋白是一種廣泛存在于真核細(xì)胞中,進(jìn)化上高度保守的一類鈣離子受體蛋白。鈣調(diào)蛋白是由148個(gè)氨基酸組成單鏈蛋白質(zhì),相對(duì)分子質(zhì)量為16.7kDa。等電點(diǎn)為4.0 左右,是一種酸性水溶性熱穩(wěn)定蛋白,可以在外界溫度很高的情況下仍可保持其良好的生物活性。不同生物來(lái)源的鈣調(diào)蛋白,其氨基酸水平極其相似,同源性也非常高,理化性質(zhì)和生物學(xué)活性的相似度也很高,這對(duì)于維持多種多樣的鈣調(diào)蛋白結(jié)合蛋白家族的相互作用非常重要。 [3]

 

鈣調(diào)蛋白本身是沒(méi)有活性的,它對(duì)鈣具有絕對(duì)的依賴性。鈣調(diào)蛋白是鈣離子的胞內(nèi)受體,鈣離子濃度增加時(shí),起激發(fā)鈣調(diào)蛋白的作用。鈣調(diào)蛋白與 Ca2+結(jié)合時(shí),因親和力的不同可分為兩種結(jié)合位點(diǎn),高親和力位點(diǎn)可以結(jié)合一個(gè)Ca2+,低親和力位點(diǎn)結(jié)合 2至 3 個(gè)Ca2+,結(jié)合Ca2+之后,蛋白質(zhì)α螺旋含量增加 5%-10%。Ca2+-CaM復(fù)合物能與靶酶結(jié)合,并激活靶酶,產(chǎn)生生物學(xué)變化,激發(fā)一系列反應(yīng)。 [5]

 

鈣調(diào)蛋白作用機(jī)理:

鈣調(diào)蛋白分子本身無(wú)酶的活性,在無(wú)Ca2+的情況下,也無(wú)生物學(xué)活性;但在胞內(nèi)Ca2+結(jié)合后,鈣調(diào)蛋白發(fā)生構(gòu)型上的變化,暴露疏水區(qū),疏水區(qū)與依賴于 鈣調(diào)蛋白的靶酶相互作用而調(diào)節(jié)酶的活性。 [4]  作為一個(gè)多功能的Ca2+傳感器,鈣調(diào)蛋白能夠應(yīng)對(duì)不同Ca2+濃度。結(jié)合Ca2+后,鈣調(diào)蛋白會(huì)發(fā)生構(gòu)象轉(zhuǎn)變,從而使含鈣的鈣調(diào)蛋白能夠與調(diào)控的目標(biāo)分子結(jié)合。鈣調(diào)蛋白的結(jié)構(gòu)及其Ca2+結(jié)合特性已有廣泛研究。蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)(PDB)中已經(jīng)有超過(guò) 190個(gè)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的鈣調(diào)蛋白結(jié)構(gòu),包括結(jié)合Ca2+和未結(jié)合Ca2+的單純鈣調(diào)蛋白結(jié)構(gòu),以及結(jié)合了不同蛋白質(zhì)片段的復(fù)合物結(jié)構(gòu)。 [3]

 

未結(jié)合 Ca2+的無(wú)鈣 鈣調(diào)蛋白(簡(jiǎn)稱為 apo-CaM)具有一個(gè)緊湊的結(jié)構(gòu),其 N 端和 C 端兩個(gè)結(jié)構(gòu)域排列到一起。結(jié)合Ca2+后形成的含鈣鈣調(diào)蛋白(簡(jiǎn)稱為 holo-CaM)構(gòu)像會(huì)從閉合狀態(tài)變換到打開的狀態(tài)。在鈣調(diào)蛋白結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變的過(guò)程中,兩個(gè)結(jié)構(gòu)域的構(gòu)像變化會(huì)導(dǎo)致其暴露出疏水表面,疏水表面對(duì)于鈣調(diào)蛋白與目標(biāo)蛋白的相互作用極其重要。鈣調(diào)蛋白構(gòu)像的可塑性和靈活性使其能采用不用的構(gòu)像,從而與不同的目標(biāo)蛋白相互作用,調(diào)節(jié)這些分子的活性。Ca2+的結(jié)合所引起的鈣調(diào)蛋白的構(gòu)像轉(zhuǎn)變對(duì)于發(fā)揮其調(diào)節(jié)功能起到至關(guān)重要的作用。 [2]

 

艾美捷Enzo人重組鈣調(diào)蛋白#BML-SE325-0001詳細(xì)信息:

替代名稱: CaM,磷酸二酯酶3':5'-環(huán)核苷酸激活劑

序列: 序列與Genbank加入M27319.1相同。

源: 產(chǎn)于大腸桿菌。

配方: 凍。無(wú)鹽。

純度: ≥95% (SDS 頁(yè)面)

純度細(xì)節(jié):通過(guò)多步色譜純化。

生物活性:引發(fā)鈣調(diào)磷酸酶(Ca 2+/鈣調(diào)蛋白依賴性Ser/Thr蛋白磷酸酶2B,PP-2B)的Ca2+依賴性活化,其效力和很大程度與純化的天然鈣調(diào)蛋白相同。

應(yīng)用說(shuō)明:鈣調(diào)蛋白可用于激活鈣調(diào)蛋白依賴性磷酸二酯酶、鈣調(diào)磷酸酶、CaM 激酶等。

重構(gòu): 在水或適當(dāng)?shù)木彌_液中復(fù)溶。

航運(yùn): 藍(lán)冰

長(zhǎng)期儲(chǔ)存:-20°C

處理: 避免凍融循環(huán)。復(fù)溶后,準(zhǔn)備等分試樣并儲(chǔ)存在-20°C。

RUO - 僅供研究使用

 

參考資料:

1  Miao Zhang, Cameron Abrams, Liping Wang,等. Structural Basis for Calmodulin as a Dynamic Calcium Sensor[J]. Structure, 20(5)   .pubmed.2013-05-09[引用日期2020-04-08]

2  李彥,蔡永琴,岳俊杰,等.鈣調(diào)蛋白的功能性運(yùn)動(dòng)分析[J].生物技術(shù)通訊,2015(1):74-77   .《中文科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)》.2015[引用日期2020-04-08]

3  李慶偉,張撼,逄越.鈣調(diào)蛋白結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及其細(xì)胞生物學(xué)功能的研究進(jìn)展[J].遼寧師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2017,40(01):74-82   .中國(guó)知網(wǎng).2017[引用日期2020-04-08]

4  楊坤,張健,蔣華良,等.鈣調(diào)蛋白構(gòu)象變化路徑[J].大連理工大學(xué)學(xué)報(bào),2009(4):499-505.   .《中文科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)》.2009[引用日期2020-04-08]

5  謝甫綈,陳貴.生物體內(nèi)的一種多功能蛋白—鈣調(diào)蛋白[J].沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1990(2):176-179   .《中文科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)》.1990[引用日期2020-04-09]

6  楊麗亞,高菂.鈣調(diào)蛋白的藥用研究[J].西北藥學(xué)雜志,2008(2):124-125   .《中文科技期刊數(shù)據(jù)庫(kù)》.2008[引用日期2020-04-09]


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