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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>Epigentek丨艾美捷代理雙硫閃DNA修飾試劑盒,突破性應(yīng)用
艾美捷Epigentek BisulFlash DNA修飾試劑盒是一套完整的優(yōu)化緩沖液和試劑,使用Epigentek快速DNA亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化技術(shù)進(jìn)行DNA修飾,該技術(shù)專門用于甲基化特異性PCR(MSP)以及基于亞硫酸氫鹽的后NGS應(yīng)用。通過允許同時(shí)處理DNA變性和亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的專有組合物,整個(gè)過程減少到僅30分鐘。此外,它可以防止超過90%的DNA損失,將未甲基化的胞嘧啶完-全轉(zhuǎn)化為尿嘧啶。
完善亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化 傳統(tǒng)方法涉及一個(gè)單獨(dú)的變性步驟,然后是隨后的亞硫酸氫鈉DNA轉(zhuǎn)化步驟,但使用BisulFlash™方法,DNA變性狀態(tài)在整個(gè)DNA亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化過程中同時(shí)保持。這種突破性的方法使DNA轉(zhuǎn)化過程明顯更快,轉(zhuǎn)換效率和準(zhǔn)確性更高。
艾美捷代理Epigentek 通過確定亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的四個(gè)關(guān)鍵成分,通過開發(fā)新的 BisulFlash™ 試劑盒,不斷創(chuàng)新:
速度:將整個(gè)過程縮短至30分鐘,無需任何試劑設(shè)置時(shí)間。
效率:將未甲基化的胞嘧啶完-全轉(zhuǎn)化為尿嘧啶 - 修飾的DNA>99.9%。
脫氧核糖核酸保護(hù):防止DNA降解,可以防止超過90%的DNA丟失,從而實(shí)現(xiàn)更大的恢復(fù)。
敏感性:從極少量的起始DNA開始進(jìn)行修飾 - 只有0.2ng或只有50個(gè)細(xì)胞。
方便的即用型DNA轉(zhuǎn)化混合液和單溫孵育以及上述功能可實(shí)現(xiàn)真正完-美的亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化。BisulFlash™ DNA修飾試劑盒適用于MS-PCR/MSP和實(shí)時(shí)MSP。
圖 1. BisulFlash DNA修飾試劑盒實(shí)現(xiàn)了DNA轉(zhuǎn)化率的高精度。 使用BisulFlash DNA修飾試劑盒處理所有CpG位點(diǎn)中通過DNA甲基化酶甲基化的50 ng基因組DNA。™™轉(zhuǎn)化后的DNA使用含有許多CpG位點(diǎn)的多個(gè)啟動(dòng)子的引物通過實(shí)時(shí)qPCR擴(kuò)增,然后直接測(cè)序。
作為下一代亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化工具,BisulFlash™ DNA修飾試劑盒包含DNA樣品超快速亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化所需的所有試劑。使用即用型轉(zhuǎn)化混合物溶液,在整個(gè)亞硫酸氫鹽DNA轉(zhuǎn)化過程中保持DNA變性狀態(tài)。這種專有解決方案允許亞硫酸氫鹽試劑將所有胞嘧啶快速轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,甲基胞嘧啶轉(zhuǎn)化率可以忽略不計(jì)?;旌衔镏兴莫?dú)-特DNA保護(hù)試劑可以防止亞硫酸氫鹽處理中DNA的化學(xué)和嗜熱降解。無毒的DNA捕獲溶液使DNA與色譜柱過濾器緊密結(jié)合,因此可以在色譜柱上進(jìn)行DNA清潔,以有效去除殘留的亞硫酸氫鹽和鹽。
快速獲得結(jié)果:
整個(gè) BisulFlash™ 程序僅需 30 分鐘 - 從將樣品 DNA 轉(zhuǎn)化為純亞硫酸氫鹽修飾 DNA。這比任何當(dāng)前使用的套件(2-8小時(shí))或自制方法(>16小時(shí))都要快得多。BisulFlash™ 試劑盒可在最短的時(shí)間內(nèi)以盡可能少的步驟提供成功實(shí)現(xiàn)亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化和 DNA 凈化所需的一切。
文獻(xiàn)參考:
Yang C et. al. (December 2023). Coordinated alternation of DNA methylation and alternative splicing of PBRM1 affect bovine sperm structure and motility. Epigenetics. 18(1):2183339.
Chakraborty S et. al. (November 2023). Trained immunity of alveolar macrophages enhances injury resolution via KLF4-MERTK-mediated efferocytosis. J Exp Med. 220(11)
Jia H et. al. (September 2023). The Epigenetic Legacy of Maternal Protein Restriction: Renal Ptger1 DNA Methylation Changes in Hypertensive Rat Offspring. Nutrients. 15(18)
艾美捷科技是Epigentek的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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