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在研究生長調(diào)控、細(xì)胞死亡機(jī)制和途徑時(shí),區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞是一項(xiàng)常見但非常重要的任務(wù)。
AkrivisBio 的活細(xì)胞與死細(xì)胞分化染色試劑盒提供即用試劑。該試劑盒結(jié)合了一種專有的細(xì)胞可滲透綠色熒光染料來染色活細(xì)胞,以及碘化丙啶(一種紅色不可滲透染料)來染色所有細(xì)胞。通過熒光顯微鏡觀察染色的細(xì)胞。
艾美捷AkrivisBio 活細(xì)胞與死細(xì)胞區(qū)分染色試劑盒:
Catalog:COS-0103
Size: Includes reagent for staining 4 x 24-well plates.
Sample Type:Adherent or Suspension Cells
Species:All
Method of Detection:Fluorescence Microscopy
Assay Type:Qualitative
Application:To stain live cells for convenient discrimination between live and dead cells visualized under a Fluorescent Microscope.
Storage Conditions:-20°C
Shipping Temperature:Gel Pack
Shelf Life:One year from the date of delivery
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目錄:COS-0103
尺寸:包括用于染色的試劑4 x 24孔板。
樣品類型:粘附細(xì)胞或懸浮細(xì)胞
物種:全部
檢測方法:熒光顯微鏡
化驗(yàn)類型:定性
應(yīng)用:對活細(xì)胞進(jìn)行染色,便于在熒光顯微鏡下區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性:將未開封的試劑盒存放在–20°C的溫度下。染色緩沖液和全細(xì)胞染料(碘化丙啶)打開后可在4°C下儲(chǔ)存?;罴?xì)胞染料應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C。
AkrivisBio 細(xì)胞衰老染色試劑盒試劑盒組成:
活細(xì)胞染料50μl綠色COS-0103-A
全細(xì)胞染料50μl紅色COS-0103-B
染色緩沖液50 ml NM COS-0103-C
染色方案:
1.為要染色的孔的數(shù)量準(zhǔn)備足夠的染色溶液。每個(gè)孔需要0.5μl活細(xì)胞染料,0.5μl全細(xì)胞染料和0.5ml染色緩沖液。相應(yīng)地?cái)U(kuò)大規(guī)模,以獲得更大數(shù)量的分析。
2.通過在500 X g下溫和離心5分鐘來收集細(xì)胞(106)。移除/丟棄上清液。
3.加入500μl染色溶液,輕輕重懸細(xì)胞沉淀。
4.在37°C下培養(yǎng)15分鐘。
5.將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到載玻片上,并用玻璃蓋玻片覆蓋細(xì)胞懸浮液。放在顯微鏡臺(tái)上觀察。注意:直接在蓋玻片上培養(yǎng)粘附細(xì)胞。染色時(shí),傾斜并去除生長培養(yǎng)基,然后平放,涂抹0.5 ml染色液溶液并孵育15分鐘。將蓋玻片翻轉(zhuǎn)到載玻片上,然后放在舞臺(tái)上。
6.立即用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞,使用帶通濾光片檢測熒光素和羅丹明,不包括較短的波長。活細(xì)胞用具有綠色熒光的細(xì)胞可滲透的活細(xì)胞染料染色(激發(fā)488nm;發(fā)射518nm)。死細(xì)胞染色會(huì)染色活細(xì)胞和死細(xì)胞都是紅色的(激發(fā)488nm;發(fā)射615nm),給出組合的黃-紅色外觀。
注意:不同細(xì)胞類型的染色條件各不相同,因此有必要手動(dòng)處理?xiàng)l件以找到合適的兩種染料的濃度。PI是一種可疑致癌物,因此在處理試劑時(shí)要小心。
艾美捷科技是AkrivisBio的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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