由于環(huán)境因素和細(xì)胞內(nèi)正常代謝過程，DNA損傷每天在細(xì)胞中以每個(gè)細(xì)胞每天1,000到1,000,000個(gè)分子損傷的速率發(fā)生。雖然這只占人類基因組的約60億個(gè)堿基（30億個(gè)堿基對(duì)）的一小部分，但對(duì)關(guān)鍵基因的未修復(fù)損傷會(huì)阻礙細(xì)胞的功能，并顯著增加患癌的可能性。彗星試驗(yàn)，或稱單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)（SCGE），是測(cè)量單個(gè)細(xì)胞中DNA損傷的常用技術(shù)。在電泳場(chǎng)的作用下，受損的細(xì)胞DNA（含有碎片和鏈斷裂）與完整的DNA分離，顯微鏡下呈現(xiàn)出經(jīng)典的“彗尾"形狀。通常通過彗尾測(cè)量來直觀估計(jì)DNA損傷的程度；然而，也有圖像分析軟件可用于測(cè)量各種參數(shù)。OxiSelect™彗星試劑盒是一種快速而敏感的用于測(cè)量細(xì)胞DNA損傷的試劑盒。每個(gè)試劑盒提供足夠的試劑進(jìn)行多達(dá)15次試驗(yàn)。

艾美捷OxiSelect彗星分析試劑盒（3孔載玻片）檢測(cè)原理：

Cell Biolabs的OxiSelect™彗星試劑盒是一種用于簡(jiǎn)單評(píng)估細(xì)胞DNA損傷的單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)（SCGE）。

首先，將單個(gè)細(xì)胞與熔化的瓊脂糖混合，然后涂抹在OxiSelect™彗星載玻片上。

然后，這些嵌入的細(xì)胞經(jīng)過裂解緩沖液和堿性溶液處理，使DNA得到松弛和變性。

最后，樣品在水平電泳槽中進(jìn)行電泳，將完整的DNA與受損的碎片分離。電泳結(jié)束后，樣品被干燥、染色以及通過熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。在這些條件下，受損的DNA（含有切割和鏈斷裂）將遷移比完整的DNA更遠(yuǎn)，并產(chǎn)生“彗尾"形狀（見圖1）。每個(gè)試劑盒提供足夠的試劑進(jìn)行多達(dá)15次試驗(yàn)。

彗星測(cè)定原理

彗星分析試劑盒相關(guān)研究：

1. STA-320: OxiSelect™ Oxidative DNA Damage ELISA Kit (8-OHdG Quantitation)

2. STA-321: OxiSelect™ DNA Double-Strand Break (DSB) Staining Kit

3. STA-324: OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP sites)

4. STA-325: OxiSelect™ Oxidative RNA Damage ELISA Kit (8-OHG Quantitation)

5. STA-351: OxiSelect™ Comet Assay Kit (3-Well Slides)

6. STA-352: OxiSelect™ Comet Assay Slides (3-Well)

7. STA-353: OxiSelect™ Comet Assay Slides (3-Well)

8. STA-355: OxiSelect™ 96-Well Comet Assay Kit

9. STA-356: OxiSelect™ 96-Well Comet Assay Slide