詳細介紹
大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞密度。
2)細胞傳代:如果大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞正常使用。
泌乳素抗體 | IgLON家族蛋白5抗體 |
細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白46抗體 | G蛋白偶聯(lián)受體FM4/調(diào)節(jié)肽U受體2抗體 |
母細胞瘤基因X染色體蛋白抗體 | C127細胞,小鼠細胞 Y1(腎上腺皮質(zhì)細胞) 人胚肺成纖維細胞;MRC-5 |
原肌球蛋白抗體 | 酸化組蛋白H3抗體 |
G蛋白激活內(nèi)向鉀通道3抗體 | 巰基氧化酶1抗體 |
SGC-7901 人胃癌細胞 | HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
蛋白激酶C抗體 | HL-7702人正常肝細胞 HL-7702 human normal liver cell 1640+10% FBS |
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體 | TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
間隙連接蛋白43抗體 | 視網(wǎng)膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 | WM451, 人黑色素瘤細胞 |
20號染色體開放閱讀框196抗體 | 人臍靜脈平滑肌細胞HUVSMC |
大鼠癌細胞;SHZ-88 | 大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基MDA-MB-453細胞,人導(dǎo)管癌細胞 鼠細胞系,B82細胞 膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) | 大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞培養(yǎng)基 100mL |
RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞 | 腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |