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詳細介紹
人外周血B淋巴原代細胞
人外周血B淋巴細胞分離自外周血；B淋巴細胞的祖細胞存在于胎肝的造血細胞島中，此后B淋巴細胞的產生和分化場所逐漸被骨髓所代替。B淋巴細胞簡稱B細胞，成熟的B細胞主要定居于淋巴結皮質淺層的淋巴小結和脾臟的紅髓和白髓的淋巴小結內。B細胞在抗原刺激下可分化為漿細胞，漿細胞可合成和分泌抗體(免疫球蛋白)，主要執(zhí)行機體的體液免疫。與T淋巴細胞相比，它的體積略大。這種淋巴細胞受抗原刺激后，會增殖分化出大量漿細胞。漿細胞可合成和分泌抗體并在血液中循環(huán)。從骨髓來的干細胞或前B細胞，在遷入法氏囊或類囊器官后，逐步分化為有免疫潛能的B細胞。成熟的B細胞經外周血遷出，進入脾臟、淋巴結，主要分布于脾小結、脾索及淋巴小結、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小結中，受抗原刺激后，分化增殖為漿細胞，合成抗體，發(fā)揮體液免疫的功能。
英文名稱 | Human Peripheral Blood B Lymphocyte Cells | 組織來源 | 外周血 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X8304 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人外周血B淋巴細胞
組織來源：外周血
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：基礎培養(yǎng)基，含IL-2、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：圓形
傳代特性：不建議傳代
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人外周血B淋巴細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的人外周血B淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法結合磁珠分選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的人外周血B淋巴經CD19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F 轉移胰腺腺癌細胞，AsPC-1細胞 McCoy細胞，小鼠成纖維細胞系 | MAP-2(Human microtubule-associated protein 2) ELISA Kit 人微管相關蛋白2 96T |
Rb2 p130： 視網膜母細胞瘤相關蛋白p130抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh RAB2/RAB2A ras癌基因家族Rab2抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155)/FITC 熒光素標記0酸化組蛋白去乙?；?span>4、5、7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CECR1： 貓眼綜合征染色體候選基因1抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BrdU 溴脫氧尿苷抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-Cullin 4a/FITC 熒光素標記Cullin 4a蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
內皮素-1抗體 Anti-ET-1 0.1ml | AGPS： 衰老相關蛋白5抗體 0.2ml |
5-8F, 人高轉移鼻咽癌細胞系 Human | 人癌細胞;MDA-MB-468 |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 彈(含100mL酶解緩沖液) 10mL | SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌耐藥細胞株 Human |
CL-0225SW620(人結腸癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人膀胱癌細胞;5637(HTB-9) |
人B淋巴母細胞;HMy2.CIR | CL-0082F9(小鼠畸胎瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 小鼠T淋巴細胞瘤(SV40T抗原轉染)，Cyc-tAg細胞 HMy2.CIR(人B 淋巴母細胞) | 人外周血B淋巴原代細胞CECR1： 貓眼綜合征染色體候選基因1抗體 0.2ml |
二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr- | 兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1 腦瘤細胞，Neuro-2A細胞 SH3細胞，小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞 |
ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACVR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) | MDA-MB-415(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CaEs-17, 人食管癌細胞株 | IgM/FITC FITC標記的兔抗大鼠IgM 0.3ml |
Rhesus antibody Rh GSK3 alpha 葡萄糖合成激酶3α抗體 規(guī)格 0.1ml | 人前列腺上皮細胞RNAHPEpiC miRNA5 μg |
EGFLAM： 皮卡丘素抗體 0.2ml | Anti-LRIG2 LRIG2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
DHEA(Mouse Dehydroepiandrosterone) ELISA Kit 小鼠脫氫表雄酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | 5-8F, 人高轉移鼻咽癌細胞系 Human |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
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