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技術(shù)文章

大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒技術(shù)參數(shù)

閱讀:371          發(fā)布時(shí)間:2020-7-20

大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指

標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗

滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏

色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。

產(chǎn)品范圍:人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動(dòng)物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血,骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研ELISA檢測(cè)試劑盒提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)

特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。

                            

大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒操作步驟:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。

大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):

1. 當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí),盡量避免起沫。

2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。

3. 每次孵育時(shí),請(qǐng)正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4. 混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色,請(qǐng)避光保存;假如微孔板后,將由物色變成不同深度的藍(lán)色。

5. 終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序*;加入終止液后,孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻;請(qǐng)充分混合。

 

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