轉(zhuǎn)基因品系油菜ZSR500 PCR試劑盒注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系油菜ZSR500 PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
服務流程：
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針（染料法只需設計引物）
2、抽提DNA、RNA，并對RNA進行逆轉(zhuǎn)錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品（引物、RNA和cDNA）
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達比色法定量　ACPT 　100 ul

細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達熒光定量　ADRP/Perilipin 2 　100 ul

鈣ATP酶SERCA蛋白表達西方雜交分析　ACSL4/FACL4 　20 ul

鈣ATP酶SERCA蛋白免疫共沉淀分析　ACSL5 　100 ul

鈣ATP酶SERCA蛋白表達定量　ADSS 　100µl

細胞鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達流式細胞儀　AKR1CL2 　100 ul

載玻片細胞鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達熒光顯微鏡　AKR1D1 　100 ul

冰凍切片組織鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達熒光顯微鏡　AKT3(Protein kinase Akt-3) 　100 ul

石蠟切片組織鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達熒光顯微鏡　AFAP1L1 　100 ul

載玻片細胞鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡　AlaRS 　100 ul

冰凍切片組織鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡　ADAMDEC1 　100 ul

石蠟切片組織鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡　ADH1C 　100 ul

細胞鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達比色法定量　ACTL6A 　100 ul

細胞鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達熒光定量　ADH4 　500 ul

鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達西方雜交分析　ADH6 　100 ug

鈣鈉交換體（NCX）蛋白免疫共沉淀分析　ADHFE1 　100 ul
轉(zhuǎn)基因品系油菜ZSR500 PCR試劑盒Thalassospira│lucentensis分離基物: 沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: PAHs降解菌，可用于生物修復。培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

Pestalotiopsis│zonata分離基物: 人心果提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 內(nèi)生菌培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;礦物油法

Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 釀造白酒、酒精。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

高空芽孢桿菌種屬: Bacillus│altitudinis分離基物: 高空氣體顆粒提供形式: 凍干物模式菌株: no應用領域: 參考菌株/分類研究培養(yǎng)基: 741生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

Acremonium│sp.分離基物: 樣/上層海提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應用領域: 大洋絲狀真菌培養(yǎng)基: 475生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

Phytophthora Phytophthora capsici安全等級: 4模式菌株: no應用領域: 教學、科研培養(yǎng)基: 馬鈴薯、葡萄糖瓊脂 (PDA)

   取去皮的馬鈴薯 200 克 , 切成小塊 , 加 1000 毫升煮沸 30 分鐘濾去馬鈴薯塊 , 將濾液補足至 1000 毫升 , 加葡萄糖 20 克 , 瓊脂 15 克 , 溶化后分裝 , 15 磅 滅菌30 分鐘。自然pH。

 

放射形根瘤菌種屬: Rhizobium│radiobacter提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 遺傳研究；攜帶溫度敏感質(zhì)粒，核酸內(nèi)切酶AtuCI培養(yǎng)基: 32生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

Bradyrhizobium│japonicum分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 分類學研究培養(yǎng)基: 63生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Trichoderma│sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 18-26℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。