詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
MLN0905 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
MLN0905是PLK1抑制劑,IC50為2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1228960-69-7 別名:PLK1 Inhibitor 純度:96.77% 分子量:486.56 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
冷域黃桿菌Azospirillum melinis
肉桂鏈霉菌Halorubrum arcis
毛頭鬼傘Haloferax larsenii
貝倫格勒座腔菌梨?;?/span>Haloferax larsenii
球黑孢菌Haloferax larsenii
斜臥青霉Halorubrum sp.
糞產(chǎn)堿菌糞亞種Paracoccus sulfuroxidans
克魯維酵母Paracoccus halophilus
亮白曲霉Baevibacterium sp.
普通變形桿菌Arthrobacter sp.
煙草色曲霉Micrococcus flavus
黑曲霉Comamonas sp.
奇異硬皮馬勃Arthrobacter sp.
矢野口鞘菌Kocuria sp.
孟氏假單胞菌Salinibacterium xinjiangense
山茶盤孢Flavobacterium glaciei
產(chǎn)棒桿菌Corynebacterium│ammoniagenes 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
綠產(chǎn)色鏈霉菌Streptomyces│viridochromogenes 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baumannii 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
PLK1抑制劑(MLN0905)L-甘露糖
其他L(-)-甘露糖
英文名稱:L-Mannose
其他英文名稱:L-(?)-Mannose
產(chǎn)品規(guī)格:AR,99%
包裝:1克/5克/25克
CAS號:10030-80-5
C6H12O6=180.16
級別:AR
含量:≥99%
比旋光度:-13~-15o(C=4, H2O)
性狀:粉末。溶于水,熔點129~131℃
用途:生化研究。