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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：腮腺炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013547
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Beta-lactoglobulin/FITC 熒光標記β-乳球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Socs 1/FITC 熒光標記細胞因子信號傳導抑制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1D1 固酮還原家族1成員D1抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗馬IgG 0.3ml
GABARAPL2 G1基丁A型受體相似蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG whole serum 兔抗豚鼠IgG抗血清 1ml
Socs 1/FITC 熒光標記細胞因子信號傳導抑制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
1,3-DPG(Human 1,3-Disphosphoglycerate, ELISA Kit 人1,3-二磷甘油Multi-class antibodies： 48T
MK1/MAPKK1/MKK1 MK1/MAPKK1抗體(N-端)Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh ITPR1 5-三磷肌醇受體1抗體 0.2ml
ECF ELISA Kit 大鼠嗜粒細胞趨化因子 96T
Proteasome 19S S5A 26S蛋白調(diào)節(jié)亞型S5a抗體 0.2ml
C22orf13 22號染色體開放閱讀框13抗體 0.2ml
MK1/MAPKK1/MKK1 MK1/MAPKK1抗體(N-端)Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的驢抗兔IgG 0.1ml
GCC2 高爾基體卷曲螺旋蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ART4/CD297 二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移4抗體 0.2ml
Icos/CD278/FITC 熒光標記誘導協(xié)同刺激分子CD278抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗猴IgG 0.1ml
p-PKC/FITC 熒光標記磷化蛋白激C抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
腮腺炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒50次變形桿菌種屬: Proteus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領(lǐng)域: Kauffmann血清型 21a 1abc培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
金色鏈霉菌種屬: Streptomyces│aureus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
纖維鏈霉菌種屬: Streptomyces│cellulosae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽胞桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 1-5cm土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 科研研究培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法
八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒乙酮 CP,98%硬脂鎘 AR咔唑(>95%,BR)
艾杜糖硫酯(IDS)ELISA試劑盒乙酮 GR,≥99.0% (GC)硫化亞鐵 Fe,60.0 - 72.0 %香柏油
癌癥促凝(CP)ELISA試劑盒異佛爾酮二 99%硬酯鉛 AR硝鈰六
癌胚鐵蛋白(CEF)ELISA試劑盒乙酰乙基烯乙酯 95% Standard for GC硫鈰八(>97%,BR)
癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒烯酰 AR,99.0%化鎳 CP,98.0% 三氧化二鉻(>99%，BR)
癌抗原27-29(CA 27-29)ELISA試劑盒己二二酰肼 98%化鎳 anhydrous, 99.99% metals basis四氧化三鈷(>99%，BR)
癌蛋白誘導轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)ELISA試劑盒正丁 AR，98.5%肼 AR,98.0%乙鈷四(>99.5%,BR)
阿米巴(Amebiasis)ELISA試劑盒1，4-丁二 99%苦酮 AR鈷粉(>99%，BR)
阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒二乙二丁 99% CP，99.0%（劇品）銅粉(>99.5%,BR)
阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA試劑盒二乙二丁 CP GR,99.8%式碳銅(銅純度：52.5~56.5%)
阿黑皮原(POMC)ELISA試劑盒1,3-丁二 99% 99.995%氧化銅粉(>99%,BR)
吖啶橙(AO)ELISA試劑盒1,3-丁二 分析標準品玫瑰紅 Indicator焦銅
ω干擾(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒1,3-丁二 98%過氧化鈉 95%銅三(>98%,BR)
κB抑制蛋白激(IKK)ELISA試劑盒基硅 Wacker quality, ≥99.0% (GC)高鈉 ACS, 99.8-100.3% 2'-脫氧腺苷5'二三鈉鹽(>97%,BR)
γ肽(Pγ)ELISA試劑盒二酮 ≥99.0%(GC)亞硝鈷鈉 AR,Co 13.5～14.5%2'-脫氧胞苷-5'-二三鈉鹽(分子生物學級)
γ谷氨酰轉(zhuǎn)移(GGT)ELISA試劑盒正十二硫 98%偏鋁鈉 AR(>98%,BR)
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