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中文名稱：ALK抑制劑(HG-14-10-04)

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。

9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。

 

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ALK抑制劑(HG-14-10-04)5′-核苷

其他5′-核苷磷解

英文名稱：5′-Nucleotidase

其他英文名稱：5′-NT；5′-Nucleotidase ；5′-Ribonucleotide phosphohydrolase

產品規(guī)格：BR，50u/mg

包裝：500U

CAS號：9027-73-0

活力：≥50 units/mg protein

活力定義：One unit will hydrolyze 1.0 μmole of inorganic phosphorus from adenosine 5′-monophosphate per min at pH 9.0 at 37℃

性狀：凍干粉末狀

用途：生化研究。核研究中的工具，是核結構分析中必需的工具。5’-NT是催化5’-核苷水解的特異性磷水解。

保存：?20℃，保質期2年

Specific Rotation：-86～-90°

性狀：凍干粉末狀。該產品是檢測大腸桿菌中uidA基因（β-葡萄糖苷基因β-glucuronidase, GUS）的底物。95%的大腸桿菌具有β-葡萄糖苷基因，用這種發(fā)色底物的培養(yǎng)基可以檢測以及定量食品樣本如肉、奶制品以及貝類中的大腸桿菌數(shù)量。國際上普遍采用該產品取代傳統(tǒng)方法以精確檢測飲用水中的大腸桿菌數(shù)量，該方法大大降低了假陽性和假陰性。該產品也用于快速檢測植物中GUS基因融合標記

用途：生化研究。β-葡糖醛（β-glucuronidase (GUS)）基因檢測的顯色底物。

保存：?20°C

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)