激光共聚焦顯微鏡的定義及優(yōu)點(diǎn)

時(shí)間：2023/3/14閱讀：2148

激光共聚焦顯微鏡和掃描電鏡都是點(diǎn)源逐點(diǎn)掃描成像，通過(guò)控制掃描驅(qū)動(dòng)范圍，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)。激光共聚焦顯微鏡是通過(guò)激光掃描的方式工作，可以獲得三維圖像。掃描電鏡是利用細(xì)聚焦電子束在樣品表面掃描時(shí)激發(fā)出來(lái)的各種物理信號(hào)來(lái)調(diào)制成像的，只能得到二維圖像，不能得到三維圖像。

激光共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點(diǎn)光源對(duì)標(biāo)本內(nèi)焦平面的每一點(diǎn)掃描，標(biāo)本上的被照射點(diǎn)，在探測(cè)針孔處成像，由探測(cè)針孔后的光點(diǎn)倍增管或冷電耦器件逐點(diǎn)或逐線接收，迅速在計(jì)算機(jī)監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。

照明針孔與探測(cè)針孔相對(duì)于物鏡焦平面是共軛的，焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔，焦平面以外的點(diǎn)不會(huì)在探測(cè)針孔處成像，這樣得到的共聚焦圖像是標(biāo)本的光學(xué)橫斷面，克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點(diǎn)。

優(yōu)點(diǎn)：

1、以激光為光源，在相應(yīng)的熒光探針標(biāo)記后，對(duì)樣本進(jìn)行逐點(diǎn)掃描，逐層獲得二維光學(xué)橫斷面圖像，具有“細(xì)胞CT”的功能，并可通過(guò)計(jì)算機(jī)三維重建軟件支持，獲得三維圖像，并可以任意角度旋轉(zhuǎn)，觀察細(xì)胞，組織立體形態(tài)和空間關(guān)系;

2、可對(duì)細(xì)胞膜的流動(dòng)性，細(xì)胞間通訊，細(xì)胞融合，細(xì)胞骨架彈性測(cè)量等，這一技術(shù)可以對(duì)活細(xì)胞和組織進(jìn)行原位動(dòng)態(tài)定量的觀察和測(cè)量。

3、可以對(duì)活細(xì)胞和組織進(jìn)行無(wú)損傷的觀察，動(dòng)態(tài)測(cè)量細(xì)胞內(nèi)的Ca離子濃度和pH值等活細(xì)胞生理信息。

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