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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質(zhì)生物學(xué)>>蛋白提取和裂解>> RIPA裂解液(不含triton x-100)

RIPA裂解液(不含triton x-100)
  • RIPA裂解液(不含triton x-100)
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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  • 品牌 貝博生物
  • 型號
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地
屬性

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更新時間:2025-07-08 21:28:28瀏覽次數(shù):164評價

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產(chǎn)品概述 product description 貝博RIPA裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制,對動物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用,是經(jīng)典常用的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等下游實驗。 本RIPA裂解液成分為25mM Tris?HCl pH 7.6, 150mM NaCl, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS。根據(jù)相應(yīng)實驗要求添加自己需要的蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑。
保存溫度
2-8℃
注意事項
1.試劑拆封后請盡快使用完!

有效期
1年
檢測方法
WB、IP等
適用樣本
細(xì)胞、組織
產(chǎn)品應(yīng)用
WB、IP等
儀器準(zhǔn)備
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機(jī)/勻漿器
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液 (pH7.4,實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
? 離心管
? 吸頭
? 一次性手套
使用注意事項
1.實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。
2.整個過程須保持樣品處于低溫狀態(tài)。
3.本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
4.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
5.禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
6.使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并清除殘留清潔劑。
7.避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

使用方法
A. 細(xì)胞裂解
1. 取5-10×106個細(xì)胞,在4℃,1000rpm條件下離心5-10分鐘,小心吸取培養(yǎng)基,盡可能吸干,收集細(xì)胞。
2. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
3. 每5×106個細(xì)胞中加入500ul冷的裂解液(每106個細(xì)胞,大約10mg或10ul壓積,加100ul RIPA裂解液。大約相當(dāng)于6孔板的每孔加入100ul~150ul,或一個75 cm2培養(yǎng)瓶加1 ml。裂解液和細(xì)胞應(yīng)充分接觸。如果RIPA裂解液不足量,細(xì)胞裂解效率將會降低),混勻后,在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
4. 在4℃,14000rpm條件下離心15分鐘。
5. 快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,用于下游實驗。

B. 組織裂解
1. 取100mg組織樣本剪碎,加入1ml裂解液,用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
2. 將組織勻漿吸入另一預(yù)冷的干凈離心管中,在4℃,10000rpm條件下離心5分鐘。
3. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,用于下游實驗。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?br>

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