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Cy5-NHS| Cy5@SE|146368-14-1 使用方法推薦
閱讀：606 發(fā)布時間：2018-7-29Cy5-NHS| Cy5@SE|146368-14-1 使用方法推薦
分子式：C37H43N3O10S2
分子量：753.88
溶解性：溶于水；DMSO
EX激發(fā)波長:646 nm
EM發(fā)射波長:664nm
用途：花菁染料Cy5，常被應用于生物分子標記，熒光成像及其他熒光生物分析。他們廣泛應用于多肽，蛋白，核苷酸等。Cy5染料具有增強熒光結(jié)合后的蛋白質(zhì)。
儲存條件：避光 -20°C避光
供應商：陜西新研博美生物科技有限公司
使用方法推薦:（僅供參考）
水溶性Cy5 NHS標記 (D-ser2)-leucineenkephalin
1. Cy5 NHS 1.0 mg 溶解于400 μL DMSO后，加入到1mL 的玻璃瓶中盛有(D-ser2)-leucine-enkephalin acetate ( 0.75 mg) 的400 μL DMSO溶液。(Dye 和peptide 投料比是 1:1)
2. 然后加入15 μL三乙胺，常溫避光攪拌反應混合物過夜。
3. 用HPLC 純化蛋白，使用蛋白C18柱子(25 cm×10 mm)，每次上樣注入2×400 μL，30分鐘梯度洗脫
從0.1% TFA水溶液到MeCN∶H2O(0.1% TFA)=70∶30，流速4mL /min。(對不同的蛋白選擇不同的合適HPLC梯度流動相)
4. 收集適當?shù)纳珟Х?，標記多肽的保留時間比未標記的多肽長。
5. 產(chǎn)品冷凍干燥成粉末或在水溶液中，-20℃避光儲存;必要時可用質(zhì)譜表征。
6.CyDye標記的蛋白穩(wěn)定性取決于蛋白本身。例如標記的IgG在4 ℃可避光保存2月;
更長期的保存需加入等體積的甘油-20 ℃避光保存。
F/P計算：
Cy5 在650 nm 的摩爾吸光系數(shù)為250 000 M-1 cm-1 ，所用蛋白在280 nm處的摩爾吸光系數(shù)為 170000 M-1 cm-1;
Cy5在280nm處的吸收是650nm處的5%。按以下公式計算F/P值。
[Cy5 dye] = (A650)/250 000
[peptide] =[A280 -(0.05×A650)]/170000
F/P final= [dye]/[peptide]= {0.68×A650}/ {A280 - (0.05×A650)}
陜西新研博美生物科技有限公司產(chǎn)品目錄價格表：
Cyanine3 NHS ester（Cy3@SE）
Cyanine5 NHS ester（Cy5@SE）
Cyanine7 NHS ester（Cy7@SE）
價格：2050/10mg 3850/25mg 6500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
Sulfo Cyanine3 NHS ester（SF Cy3@SE）
Sulfo Cyanine5 NHS ester（SF Cy5@SE）
Sulfo Cyanine7 NHS ester（SF Cy7@SE）
價格：2850/10mg 5500/25mg 9500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
Cyanine3 amine（Cy3@NH2）
Cyanine5 amine（Cy5@NH2）
Cyanine7 amine（Cy7@NH2）
價格：2050/10mg 3850/25mg 6500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
Sulfo Cyanine3 amine（SF Cy3@NH2）
Sulfo Cyanine5 amine（SF Cy5@NH2）
Sulfo Cyanine7 amine（SF Cy7@NH2）
價格：2850/10mg 5500/25mg 9500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
Cyanine3 azide (Cy3@N3)
Cyanine5 azide (Cy5@N3)
Cyanine7 azide (Cy7@N3)
價格：2050/10mg 3850/25mg 6500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
Sulfo Cyanine3 azide (SF Cy3@N3)
Sulfo Cyanine5 azide (SF Cy5@N3)
Sulfo Cyanine7 azide (SF Cy7@N3)
價格：2850/10mg 5500/25mg 9500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
Cyanine3 alkyne (Cy3@alk)
Cyanine5 alkyne (Cy5@Alk)
Cyanine7 alkyne (Cy7@Alk)
價格：2050/10mg 3850/25mg 6500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
Sulfo Cyanine3 alkyne (SF Cy3@Alk)
Sulfo Cyanine5 alkyne (SF Cy5@Alk)
Sulfo Cyanine7 alkyne (SF Cy7@Alk)
價格：2850/10mg 5500/25mg 9500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
Cyanine3 maleimide (Cy3@Mal)
Cyanine5 maleimide (Cy5@Mal)
Cyanine7 maleimide (Cy7@Mal)
價格：2050/10mg 3850/25mg 6500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
Sulfo Cyanine3 maleimide (SF Cy3@MAL)
Sulfo Cyanine5 maleimide (SF Cy5@MAL)
Sulfo Cyanine7 maleimide (SF Cy7@MAL)
價格：2850/10mg 5500/25mg 9500/50mg 現(xiàn)貨 95%純度
供應商：陜西新研博美生物科技有限公司