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技術文章

Cy5-NHS| Cy5@SE|146368-14-1 使用方法推薦

閱讀:609          發(fā)布時間:2018-7-29

Cy5-NHS| Cy5@SE|146368-14-1 使用方法推薦

 

分子式:C37H43N3O10S2

分子量:753.88

溶解性:溶于水;DMSO

EX激發(fā)波長:646 nm

EM發(fā)射波長:664nm

用途:花菁染料Cy5,常被應用于生物分子標記,熒光成像及其他熒光生物分析。他們廣泛應用于多肽,蛋白,核苷酸等。Cy5染料具有增強熒光結合后的蛋白質(zhì)。

儲存條件:避光 -20°C避光

供應商:陜西新研博美生物科技有限公司

 

使用方法推薦:(僅供參考)

水溶性Cy5 NHS標記 (D-ser2)-leucineenkephalin

1. Cy5 NHS 1.0 mg 溶解于400 μL DMSO后,加入到1mL 的玻璃瓶中盛有(D-ser2)-leucine-enkephalin acetate ( 0.75 mg) 的400 μL DMSO溶液。(Dye 和peptide 投料比是 1:1)

2. 然后加入15 μL三乙胺,常溫避光攪拌反應混合物過夜。

3. 用HPLC 純化蛋白,使用蛋白C18柱子(25 cm×10 mm),每次上樣注入2×400 μL,30分鐘梯度洗脫

從0.1% TFA水溶液到MeCN∶H2O(0.1% TFA)=70∶30,流速4mL /min。(對不同的蛋白選擇不同的合適HPLC梯度流動相)

4. 收集適當?shù)纳珟Х澹瑯擞浂嚯牡谋A魰r間比未標記的多肽長。

5. 產(chǎn)品冷凍干燥成粉末或在水溶液中,-20℃避光儲存;必要時可用質(zhì)譜表征。

6.CyDye標記的蛋白穩(wěn)定性取決于蛋白本身。例如標記的IgG在4 ℃可避光保存2月;

更長期的保存需加入等體積的甘油-20 ℃避光保存。

F/P計算:

Cy5 在650 nm 的摩爾吸光系數(shù)為250 000 M-1 cm-1 ,所用蛋白在280 nm處的摩爾吸光系數(shù)為 170000 M-1 cm-1;

Cy5在280nm處的吸收是650nm處的5%。按以下公式計算F/P值。

[Cy5 dye] = (A650)/250 000

[peptide] =[A280 -(0.05×A650)]/170000

F/P final= [dye]/[peptide]= {0.68×A650}/ {A280 - (0.05×A650)}

 

陜西新研博美生物科技有限公司產(chǎn)品目錄價格表:

Cyanine3 NHS ester(Cy3@SE)

Cyanine5 NHS ester(Cy5@SE)

Cyanine7 NHS ester(Cy7@SE)

價格:2050/10mg  3850/25mg  6500/50mg   現(xiàn)貨      95%純度

 

Sulfo Cyanine3 NHS ester(SF Cy3@SE)

Sulfo Cyanine5 NHS ester(SF Cy5@SE)

Sulfo Cyanine7 NHS ester(SF Cy7@SE)

價格:2850/10mg  5500/25mg  9500/50mg   現(xiàn)貨     95%純度

 

Cyanine3 amine(Cy3@NH2)

Cyanine5 amine(Cy5@NH2)

Cyanine7 amine(Cy7@NH2)

價格:2050/10mg  3850/25mg  6500/50mg   現(xiàn)貨      95%純度

 

Sulfo Cyanine3 amine(SF Cy3@NH2)

Sulfo Cyanine5 amine(SF Cy5@NH2)

Sulfo Cyanine7 amine(SF Cy7@NH2)

價格:2850/10mg  5500/25mg  9500/50mg   現(xiàn)貨      95%純度

 

Cyanine3 azide (Cy3@N3)

Cyanine5 azide (Cy5@N3)

Cyanine7 azide (Cy7@N3)

價格:2050/10mg  3850/25mg  6500/50mg   現(xiàn)貨      95%純度

 

Sulfo Cyanine3 azide (SF Cy3@N3)

Sulfo Cyanine5 azide (SF Cy5@N3)

Sulfo Cyanine7 azide (SF Cy7@N3)

價格:2850/10mg  5500/25mg  9500/50mg   現(xiàn)貨      95%純度

 

Cyanine3 alkyne (Cy3@alk)

Cyanine5 alkyne (Cy5@Alk)

Cyanine7 alkyne (Cy7@Alk)

價格:2050/10mg  3850/25mg  6500/50mg   現(xiàn)貨      95%純度

 

Sulfo Cyanine3 alkyne (SF Cy3@Alk)

Sulfo Cyanine5 alkyne (SF Cy5@Alk)

Sulfo Cyanine7 alkyne (SF Cy7@Alk)

價格:2850/10mg  5500/25mg  9500/50mg   現(xiàn)貨      95%純度

 

Cyanine3 maleimide (Cy3@Mal)

Cyanine5 maleimide (Cy5@Mal)

Cyanine7 maleimide (Cy7@Mal)

價格:2050/10mg  3850/25mg  6500/50mg   現(xiàn)貨      95%純度

 

Sulfo Cyanine3 maleimide (SF Cy3@MAL)

Sulfo Cyanine5 maleimide (SF Cy5@MAL)

Sulfo Cyanine7 maleimide (SF Cy7@MAL)

價格:2850/10mg  5500/25mg  9500/50mg   現(xiàn)貨      95%純度

 供應商:陜西新研博美生物科技有限公司

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