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干貨分享|病毒純化過程中，該如何正確使用全能核酸酶？

2023-8-18　　閱讀(191)

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病毒疫苗的生產(chǎn)、細(xì)胞治療與基因治療等領(lǐng)域均可能會(huì)用到病毒，對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行控制對(duì)于保障上述產(chǎn)品的安全性和有效性具有及其重要意義。其中HCD殘留可能會(huì)傳遞腫瘤或病毒相關(guān)基因，造成潛在的危險(xiǎn)性，因此，去除宿主核酸或在程度上降低其殘留刻不容緩。




逐典Pannarase全能核酸酶

逐典Pannarase全能核酸酶是一種來源于Serratia marcescens的非特異性核酸內(nèi)切酶，該酶可以將任何形式的 DNA 和 RNA  (線性、環(huán)形、超螺旋)降解成3-5bp的寡核苷酸，并可在一系列寬泛的操作條件下保持高效性。






接下來小編就帶您

一起了解

在病毒純化過程中

如何正確使用全能核酸酶


常見的病毒純化流程


全能核酸酶應(yīng)用條件

全能核酸酶的酶活會(huì)受到多種因素的影響（例如溫度、pH、離子強(qiáng)度等），故用量范圍也會(huì)從0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此，不同的操作環(huán)境下酶的最佳濃度不同，需要通過實(shí)驗(yàn)設(shè)置梯度進(jìn)行最佳條件的摸索。

以下是文獻(xiàn)中具體的應(yīng)用實(shí)例：

1. 樣品：狂犬病毒濃縮液

處理?xiàng)l件:核酸酶濃度50~90U/ml ,

37 ℃處理 2 h,轉(zhuǎn)入18 ~ 26 ℃處理 6h




2. 樣品：狂犬病病毒濃縮液

處理?xiàng)l件：25、50和100 U/ml，37℃



3. 樣品：流感病毒濃縮液

處理?xiàng)l件：10 U/mL，37℃



參考文獻(xiàn)

[1] 崔燕平. 非限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)狂犬病疫苗中Vero細(xì)胞DNA的去除作用[J]. 中國生物制品學(xué)雜志, v.27(04):444-447.

[2] 劉杰,劉輝,楊會(huì)強(qiáng),康莊,孫艷,毛川成,何敏,李玉華.多種方法結(jié)合去除凍干人用狂犬病疫苗中Vero細(xì)胞殘留DNA[J].中國生物制品學(xué)雜志,2013,26(12):1827-1830.

[3] 阮朝列,施錦麗,李衛(wèi)東等.Benzonase核酸酶在Vero細(xì)胞流感病毒滅活疫苗中的應(yīng)用研究[J].病毒學(xué)報(bào),2023,39(04):980-990.




逐典Pannarase全能核酸酶從E.coli中表達(dá)純化并在GMP條件下生產(chǎn)，可高效去除各種樣品中的核酸雜質(zhì)，助力解決廣大疫苗生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療廠商解決產(chǎn)品的核酸殘留問題；此外某些病毒生產(chǎn)中可能會(huì)涉及到高鹽的環(huán)境，逐典Pannarase耐高鹽全能核酸酶將成為您“疑難雜癥"的選擇！



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