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操作技巧 | 如何降低內(nèi)毒素檢測失敗率?

2023-12-4  閱讀(182)

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在日常的內(nèi)毒素檢測中,我們經(jīng)常會遇到結(jié)果異?;蚴? 常見為空白孔反應(yīng)、標(biāo)準(zhǔn)曲線失敗和CV%值超標(biāo)。

今天我們來聊聊,針對以上這些,在日常的內(nèi)毒素檢測中,該怎么應(yīng)對?

1. 空白孔和陰性對照的失敗

空白孔反應(yīng)是分析方法失敗常見原因之一

  • 移液過程中,避免灰塵、毛發(fā)、皮膚細(xì)胞和其他顆粒物對反應(yīng)孔造成污染

  • 樣品準(zhǔn)備時,移液吸頭不應(yīng)經(jīng)過空白孔或陰性對照孔

  • 制備標(biāo)準(zhǔn)品時,確保充分混勻,保證濃度點(diǎn)和空白點(diǎn)有濃度差

  • 切勿使用可能被污染的LAL試劑水制備空白孔

  • 通過使用可靠廠商的試劑耗材,進(jìn)一步降低污染的可能性


2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線和陽性對照的失敗

這類實驗的失敗通常是與實驗人員和移液過程相關(guān)



  • 標(biāo)準(zhǔn)品制備過程中正確使用已校準(zhǔn)的移液器和匹配的吸頭

  • 實驗人員需專注于標(biāo)準(zhǔn)品、樣品制備和96孔板制備過程(*非常重要)

  • 添加鱟試劑時推薦使用多通道移液器降低方法變異性


3. “熱孔"或單孔污染

在空白、陰性對照或內(nèi)毒素含量較低的樣品孔中,常常可能發(fā)生熱孔或單孔污染。通常表現(xiàn)為復(fù)孔中一個較另一個相比,有明顯的高內(nèi)毒素信號。“熱孔"確切原因尚不清楚,如果確認(rèn)多次的重新測試是由于96孔板的原因,建議更換新批次的96孔板。

以上所提到的情況中,大多數(shù)與人工操作有關(guān),Lonza的PyroTecTM PRO 系統(tǒng)是一個靈活、強(qiáng)大和用戶友好的自動化細(xì)菌內(nèi)毒素檢測系統(tǒng),能有效減少人工手動過程中的移液和加樣錯誤,大大降低實驗人員操作時間、提高實驗效率。



此外,PyroTecTM PRO系統(tǒng)樣品配置高度靈活、實驗準(zhǔn)備時間短(<10min/42樣品)、操作便利等特點(diǎn)。




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