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逐典Pannarase全能核酸酶FAQ

2024-3-19  閱讀(141)

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Q:在哪一步中加入Pannarase全能核酸酶?

A:這取決于您處理的樣本。在病毒純化時,一般在病毒澄清后加入;大腸桿菌蛋白純化時,可以在菌體裂解時就加入;在處理細胞結團問題時,可以直接加入培養(yǎng)基中與細胞共培養(yǎng)。

Q:如果反應溫度無法達到37℃,該如何使用?

A:酶活性受到溫度、處理時間、酶活單位的影響,如果溫度無法達到37'C,可以適當添加酶的用量,或者延長孵育時間。

Q:全能核酸酶是否與蛋白酶抑制劑兼容?

A:可以兼容,但需要注意的是許多蛋白酶抑制劑含有EDTA。EDTA開始高于1 mM時,EDTA將抑制部分核酸酶的活性。

Q:按照規(guī)定用量添加了全能核酸酶,為什么降解核酸的效果不佳?

A:全能核酸酶的活性受到許多因素的影響。首先,反應體系中必須含有1-5 mM的Mg2;此外,如果反應體系中單價陽離子濃度>300 mM、磷酸鹽濃度>100 mM和EDTA濃度>1 mM時活性會被抑制。

Q:如何去除全能核酸酶?

A:可以采用多種方式去除。例如深層過濾、切向流過濾、濃縮和透析過濾、色譜層析等方式。


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