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干細(xì)胞研究是近年來醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域中最引人注目的熱點(diǎn)之一。現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)骨髓中除了造血干細(xì)胞以外,還存在一類骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSC),是中胚層發(fā)育的早期細(xì)胞。這類細(xì)胞可以通過體外貼壁培養(yǎng)加以分離,分化為多種造血以外的組織細(xì)胞,特別是中胚層和外胚層來源組織的細(xì)胞。
01產(chǎn)品介紹
增強(qiáng)型人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基（hMSC Medium Plus）是埃澤思生物(Applied Cell®)自主研發(fā)的一款無外源動(dòng)物成分的人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基?？蓱?yīng)用于人骨髓、脂肪、臍帶等組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞的原代分離、擴(kuò)增與傳代培養(yǎng)，并保持其多向分化潛能。本產(chǎn)品水平遠(yuǎn)低于中國藥典標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)過程遵循IS09001體系,并符合GMP指導(dǎo)原則。
增強(qiáng)型人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基主要成分:氨基酸，維生素、無機(jī)鹽、白蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、微量元素，細(xì)胞因子等。
規(guī)格:基礎(chǔ)培養(yǎng)基 490mL，添加劑 10mL
運(yùn)輸保存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基2-8℃，添加劑≤-10℃;混合后2-8°C
保質(zhì)期:12個(gè)月
02產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、高效增殖能力、明顯降低單位細(xì)胞生產(chǎn)成本；
2、傳代20代，細(xì)胞依然保持良好的形態(tài)與分化能力；
3、無動(dòng)物源，成分確定，可以明顯減少批間差異，確保每一批次產(chǎn)品的高效能和穩(wěn)定性；
4、符合細(xì)胞藥物研發(fā)標(biāo)準(zhǔn)，可以進(jìn)行藥物研發(fā)申報(bào)。
03增殖能力
實(shí)驗(yàn)步驟
1、 將6000 cells/cm2 的細(xì)胞接種10cm培養(yǎng)皿中，初始細(xì)胞數(shù)為3.3x10^5 cells；在37°C，5% CO2的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)3天。
2、第三天結(jié)束后，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且將細(xì)胞傳至T175 瓶；在37°C，5%CO2的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)3天。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
hMSC Medium Plus 在3天內(nèi)顯著提高了細(xì)胞增殖率，細(xì)胞數(shù)達(dá)到4.10 x10^6cells/mL，幾乎是競(jìng)品2.26x10^6 cells/mL的兩倍。
在傳代后的第六天，hMSC Medium Plus的細(xì)胞數(shù)達(dá)到1.57x10^7 cells/mL，顯著高于競(jìng)品的0.96x10^7 cells/mL。
hMSC Medium Plus 展現(xiàn)出細(xì)胞增殖能力和傳代效率，能夠在更短時(shí)間內(nèi)獲得更多高質(zhì)量的間充質(zhì)干細(xì)胞。
這一優(yōu)勢(shì)使得hMSC Medium Plus 在干細(xì)胞研究和應(yīng)用中具有顯著的競(jìng)爭(zhēng)力，適合大規(guī)模生產(chǎn)和高通量實(shí)驗(yàn)。
04穩(wěn)定傳代，持久效能
增強(qiáng)型人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(hMSC Medium Plus)經(jīng)過嚴(yán)格的測(cè)試可以穩(wěn)定傳代20代，并且保持著增殖和分化能力。
05流式檢測(cè)
CD105是細(xì)胞表面I型膜糖蛋白，在細(xì)胞遷移方面發(fā)揮重要作用。CD90廣泛表達(dá)于各類干細(xì)胞的表面，涉及細(xì)胞間的粘附、遷移，若細(xì)胞貼壁能力缺失或產(chǎn)生接觸抑制，CD90會(huì)有明顯下降。
幾種陰性標(biāo)志物主要為血液類細(xì)胞的標(biāo)志物，MSC不應(yīng)有所表達(dá)。因此，對(duì)于高代次的MSC，CD105和CD90若正常表達(dá)，一般所有的指標(biāo)都沒有異常。hMSC Medium Plus能夠穩(wěn)定維持高代次陽性標(biāo)志物在98%以上。下圖為P12代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記物的檢測(cè)。
06三項(xiàng)分化
hMSC Medium Plus 支持間充質(zhì)干細(xì)胞的多項(xiàng)分化能力，包括成脂、成骨和成軟骨分化，為多種研究應(yīng)用提供強(qiáng)大支持。
hMSC Medium Plus 所培養(yǎng)出的MSC具有增殖能力、可穩(wěn)定傳代、表面標(biāo)志物及三項(xiàng)分化的穩(wěn)定均顯示出這款培養(yǎng)基產(chǎn)品在MSC基本質(zhì)量中的穩(wěn)定性。
