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轉染方法怎么選
你真的了解電轉嗎？
LONZA
▲轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。《分子克隆實驗指南》將轉染（Transfection）定義為：“將外源基因導入哺乳動物細胞的一系列技術的統(tǒng)稱"，實踐中細胞轉染是指將外源分子如DNA、RNA、蛋白等生物活性分子導入真核細胞的技術。
▲按照原理來分類
細胞轉染的方式可以分為3類:化學法、物理法和生物介導方法。電轉染作為具有代表性的物理方法轉染，出現(xiàn)于1982年，作為通用、易用的細胞轉染方法，具有其他方法優(yōu)勢，如重復性好、適用范圍廣等特點，在一定條件下兼得電轉效率和細胞活率，尤其對目前對原代細胞和一般認為難轉染的細胞有較好的轉染效率。
▲各轉染方法優(yōu)缺點整理
01
Nucleofector™技術
▲Nucleofector™技術
隨著系統(tǒng)生物學與交義學科方法的應用，要求細胞和系統(tǒng)模型越來越接近體內細胞的功能。這就意味著將來的細胞轉染多數(shù)會是原代細胞的轉染。而傳統(tǒng)的方法很難成功轉染原代細胞。另外即使使用細胞系做為系統(tǒng)模型，傳統(tǒng)的方法也難重復出好的細胞轉染效率與成活率。Nucleofector技術就從根本上解決這個問題，無論是原代細胞、干細胞、還是細胞系，它每次都可重復出很高的轉染效率。
▲原理
Nucleofection"技術是利用電擊在細胞膜上開個小孔，綜合各種特定細胞轉染程序與轉染液的作用，核酸底物不僅可以進入細胞質，還可直接通過核膜進入細胞核。這使得細胞最高轉染可達99%，而且實現(xiàn)轉染不依賴于細胞的分裂。
▲優(yōu)勢
與其他電轉方法相比，4D-Nucleofector™核轉系統(tǒng)，除了Lonza所研發(fā)的適用于不同實驗目的的電轉儀設備之外，還配套不同細胞專屬的電轉試劑。該系統(tǒng)改進了傳統(tǒng)金屬電極材質的電極杯，通過高分子導電聚合物穩(wěn)定電脈沖發(fā)生的過程，避免金屬離子釋放對細胞帶來的毒性。操作簡單靈活、通量多元化、還有保護細胞功能貼壁轉染模塊（Y模塊）無需消化就可轉染，更好的保護細胞功能，特別適用于發(fā)育到后期的神經元轉染。
02
4D-Nucleofector核轉染系統(tǒng)
▲Lonza 4D Nucleofector™平臺從實際需求出發(fā)，開發(fā)了從低通量到高通量，小體積到大體積的電轉染，研發(fā)到生產規(guī)模的設備型號，保證從小體系篩選到大規(guī)模電轉的可行性和放大工藝可轉移。包括如下功能模塊并匹配對應應用方向：
▲只需5步簡單的操作方案，實現(xiàn)輕松電轉?。?！
▲4D-Nucleofector™ 核轉系統(tǒng)，除了電轉儀設備本身之外，還有不同細胞專屬的電轉試劑，可以支持在不同類型的細胞中都可以實現(xiàn)高效的，同時維持細胞功能的轉染結果。該系統(tǒng)改進了傳統(tǒng)金屬電極材質的電極杯，通過一種技術利用高分子導電聚合物穩(wěn)定電脈沖發(fā)生的過程，避免金屬離子釋放對細胞本身帶來的金屬離子毒性影響。在Lonza BioscienceKnowledge Center里面呈現(xiàn)了超過700種即用型protocol（包括細胞培養(yǎng)，傳代、電轉準備、電轉方案、孵育方法以及優(yōu)化方案）及海量的資料和應用FAQ（且一直在實際各地技術團隊的協(xié)作下不斷更新）。
