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Cary 3500 多池紫外-可見分光光度計用于蛋白質分析的優(yōu)勢

閱讀:308          發(fā)布時間:2018-12-13
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紫外-可見分光光度計測量為樣品的質量控制檢查提供了一種快速可靠的方法。它們 還可用于計算比活性或估算純化后的產(chǎn)率,并鑒定含有蛋白質和氨基酸的組分。

 

含有芳香側鏈氨基酸的蛋白質,在接近 280 nm 處產(chǎn)生吸收。因此可以使用紫外-可 見分光光度計進行定量分析。當吸收系數(shù)已知時,可根據(jù)比爾-朗伯定律 (1) 確定含 有這些氨基酸的蛋白質的濃度。通常蛋白質的樣品量有限,以少體積進行測量對 于樣品的保存至關重要。通過波長掃描可提供潛在污染物的信息。

 

Cary 3500 多池紫外-可見分光光度計具有光學準直的集成式多池支架,與超微 量比色皿(圖 1)配合使用,非常適用于可靠且可重現(xiàn)的定性及定量測量。

 

為證明重現(xiàn)性,用超微量比色皿 (70 µL) 重復測量 3.0 mg/mL BSA 溶液 20 次,其中參比位置為裝有 PBS 緩沖液的相同超微 量比色皿。此外,使用 3.5 mL、10 mm 光程的標準石英比色 皿對同樣的溶液進行另外 20 次重復測量,以裝有 PBS 緩沖液 的相同比色皿作為參比。這些測量均在 278 nm 處進行,信號 采集平均時間為 1 秒,光譜帶寬為 2 nm。

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