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真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)各種蛋白的純化技巧

2022-4-22  閱讀(1434)

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  真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)各種蛋白的純化技巧:
  天然大分子蛋白分離純化:
  結(jié)合待分離的蛋白理化性質(zhì),適當(dāng)選用適合孔徑的分子篩截留分離純化,配合陰離子柱或陽離子柱,使用HLPC分離設(shè)備,收取洗脫峰,可以獲得純度95%以上的天然蛋白。
  天然小肽分離純化:
  通過分子篩初步截留大分子蛋白,使用大孔樹脂或反向樹脂純化小分子化合物,進一步通過HPLC和MS對小肽分子鑒定,由于小肽分子一般含量較低,獲得的蛋白量較少。
  未知蛋白混合物分離純化:
  客戶需告知帶分離蛋白的基本特性,由鐘鼎分離純化,最終通過質(zhì)譜鑒定,活性鑒定等多種方案確認(rèn)分離產(chǎn)物。
  真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)對樣品的要求:
  1.客戶應(yīng)提供準(zhǔn)確的基因序列,明確蛋白標(biāo)簽及要求,告知蛋白用途。
  2.客戶提供載體質(zhì)粒,最小量不得低于100ng,同時提供原始質(zhì)粒圖譜及序列文件,插入基因后重組質(zhì)粒的測序報告。
  3.委托純化的重組蛋白應(yīng)帶有His-tag或GST-tag;帶其他標(biāo)簽或無標(biāo)簽的重組蛋白,需另行商議純化方法。
  4.如實驗需要,客戶需提供重組蛋白序列、分子量、等電點、緩沖液成分及pH等信息。

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