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真核表達(dá)細(xì)胞區(qū)別于原核細(xì)胞主要在于有細(xì)胞核，核內(nèi)遺傳物質(zhì)由核膜將其與細(xì)胞的其他成分隔開。真核細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要存在于細(xì)胞核內(nèi)，細(xì)胞內(nèi)的其他細(xì)胞器如線粒體和葉綠體等也含有少量遺傳物質(zhì)。真核表達(dá)是近年來常用的一種表達(dá)重組蛋白的手段，它補(bǔ)充了一些原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)中所缺乏的功能，例如真核表達(dá)時(shí)能夠形成穩(wěn)定的二硫鍵，在蛋白經(jīng)過翻譯后可對(duì)蛋白進(jìn)行正確修飾，使表達(dá)出來的蛋白更具天然活性而不是被降解或者是形成包涵體；利用真核表達(dá)系統(tǒng)可以誘導(dǎo)高效表達(dá)，加快了人們對(duì)基因研究以及藥物研究的進(jìn)程。真核表達(dá)細(xì)胞優(yōu)點(diǎn)是哪些
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親和層析是利用生物分子間專一的親和力而進(jìn)行分離的一種層析技術(shù)。抗體與抗原、激素與受體、酶與底物等這些生物大分子之間因存在這種特異性親和力，常常一種分子作為配基，制備成親和層析介質(zhì)，用來純化對(duì)應(yīng)的目標(biāo)分子，這種方法稱為親和層析法。具體來講，親和層析法即是將配基固定于惰性載體上，混合物中的目標(biāo)蛋白與配基特異性結(jié)合，從而被捕獲，無關(guān)的雜質(zhì)組分隨著流動(dòng)相被沖洗下來，然后選擇合適的洗脫液講目標(biāo)蛋白從載體上洗脫下來，從而得到單一組分的純化物質(zhì)。抗體親和層析蛋白A、蛋白G和蛋白L是科學(xué)家陸續(xù)發(fā)現(xiàn)能夠與抗體進(jìn)行
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重組人干擾素α2b具有廣譜抗病毒作用，其抗病毒機(jī)制主要通過干擾素同靶細(xì)胞表面干擾素受體結(jié)合，誘導(dǎo)靶細(xì)胞內(nèi)2-5（A）合成酶、蛋白激酶PKR、MX蛋白等多種抗病毒蛋白，阻止病毒蛋白質(zhì)的合成、抑制病毒核酸的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄而實(shí)現(xiàn)。更是一種抗病毒的藥物，主要用于體內(nèi)的病毒的感染，或者是提高人體的自身的免疫能力的，對(duì)于人體的很多疾病都有著很重大的作用。重組人干擾素應(yīng)于避光、干燥、于2-8度保存。有效期18個(gè)月。表明重組人干擾素α2b不能再使用的現(xiàn)象有：本品凍干制劑為白色疏松體，溶解后為無色透明液體，如遇有渾濁
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真核表達(dá)細(xì)胞與原核表達(dá)的區(qū)別有哪些
真核表達(dá)細(xì)胞和原核變達(dá)的區(qū)別：真核表達(dá)：常用酵母、昆蟲、動(dòng)物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞。其優(yōu)點(diǎn)是根據(jù)原核生物蛋白與靶DNA的高度特異性相互作用而設(shè)計(jì)，不存在基因的非特異性激活或抑制。它可以誘導(dǎo)高達(dá)105倍的高效基因表達(dá)?？梢試?yán)格控制基因表達(dá)。原核表達(dá)：它的優(yōu)點(diǎn)是可以在短時(shí)間內(nèi)獲得基因表達(dá)產(chǎn)物，而且成本相對(duì)較低。方法也簡(jiǎn)單，可以表達(dá)的蛋白質(zhì)也很多。但缺點(diǎn)是表達(dá)的蛋白質(zhì)沒有經(jīng)過修飾，不一定具有天然活性，表達(dá)系統(tǒng)不能調(diào)節(jié)表達(dá)時(shí)間和表達(dá)水平。一些基因的持續(xù)表達(dá)會(huì)對(duì)宿主細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，過度表達(dá)可能導(dǎo)致非生理反應(yīng)。目 -
哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)與其它系統(tǒng)相比怎樣？
哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)是適用于生成具有天然結(jié)構(gòu)和活性的哺乳動(dòng)物蛋白的選用表達(dá)平臺(tái)，可以實(shí)現(xiàn)高水平的翻譯后加工，使蛋白質(zhì)獲得最佳功能活性，適合在最類似生理學(xué)的環(huán)境中研究特定蛋白質(zhì)的功能。它常用于抗體和治療性蛋白質(zhì)以及人類功能細(xì)胞分析的蛋白質(zhì)表達(dá)。哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)與其它系統(tǒng)相比，該系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)在于能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的正確折疊，提供復(fù)雜的N型糖基化和準(zhǔn)確的O型糖基化等多種翻譯后加工功能，因而表達(dá)產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)、理化特性和生物學(xué)功能方面接近天然高等生物蛋白質(zhì)分子。哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)優(yōu)點(diǎn)：1.重組DNA易轉(zhuǎn)染，遺傳 -
重組人BMP4蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式，原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài)，真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存，這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定，在零下八十℃條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解，其中溶解的方法非常關(guān)鍵，因?yàn)槿芙獠缓脮?huì)降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細(xì)注意。重組人BMP4蛋白真核表達(dá)與原核表達(dá)如何選擇：真核表達(dá)：常用酵母、昆蟲、動(dòng)物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞。其優(yōu)點(diǎn)是根據(jù)原核生物蛋白與靶DNA的高度特異性相互作用而設(shè)計(jì)，不存在基因的非特異性激活或抑制。
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真核表達(dá)細(xì)胞啟動(dòng)子介紹及作用分析
真核表達(dá)細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)：重組DNA易轉(zhuǎn)染，遺傳穩(wěn)定，可重復(fù)；識(shí)別和去除內(nèi)含子；進(jìn)行翻譯后修飾；磷酸化、糖基化、二硫鍵、寡聚體等的形成、高級(jí)結(jié)構(gòu)的正確折疊；產(chǎn)品的構(gòu)型正確率高，可被改造成類人體源性，免疫源性好；可分泌至培養(yǎng)基，提純工藝簡(jiǎn)單，成本低；可用于基因治療。細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)能誘導(dǎo)高效表達(dá)，對(duì)表達(dá)的蛋白進(jìn)行正確折疊，并進(jìn)行復(fù)雜糖基化修飾，蛋白活性接近于天然蛋白，不需去除內(nèi)毒素，周期較長(zhǎng)，操作復(fù)雜，需要細(xì)胞房，無菌，成本投入高。真核表達(dá)細(xì)胞啟動(dòng)子介紹及作用分析:RNA聚合酶(II)結(jié)合并起動(dòng)轉(zhuǎn)錄的DNA -
細(xì)胞因子是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì)，具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫等多種功能。細(xì)胞因子是由多種細(xì)胞產(chǎn)生的，具有廣泛調(diào)節(jié)細(xì)胞功能作用的多肽分子，細(xì)胞因子不僅作用于免疫系統(tǒng)和造血系統(tǒng)，還廣泛作用于神經(jīng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)，對(duì)細(xì)胞間相互作用、細(xì)胞的增殖分化和效應(yīng)功能有重要的調(diào)節(jié)作用。重組人GDF3重組要求：1.真實(shí)性：重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析；必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE,RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測(cè)其真實(shí)性。2.純度：應(yīng)用兩種方法分析產(chǎn)品純度。3.生物
