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特色方案|食品中唾液酸的測定

閱讀:1192      發(fā)布時(shí)間:2024-1-29
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本文建立了食品中唾液酸測定的HPLC測定方法。參考GB 3161.4-2023中一法色譜條件,采用色譜柱ShimNex WP SAX、ShimNex HE SAX分析干燕碎樣品中的唾液酸,結(jié)果顯示,唾液酸峰型對(duì)稱,無相鄰雜質(zhì)干擾,重現(xiàn)性良好,滿足檢測要求。此方法可為食品中唾液酸的測定提供參考。

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材

ShimadzuLC-20AD高效液相色譜儀;

色譜柱:ShimNex WP SAX(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01237-07)

ShimNex HE SAX(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01245-37)

純水機(jī):PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱+取水器)SHIMSEN Disc HPTFE針式過濾器(P/N:380-00341);LC/MS認(rèn)證樣品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);


1.2 唾液酸標(biāo)準(zhǔn)工作液的制備

吸取唾液酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1000mg/L)1.0mL于100mL容量瓶中,加入0.1%磷酸溶液-乙腈(4+6)定容至刻度,混勻,即得。唾液酸濃度為10mg/mL。


1.3 試樣溶液的制備

稱取0.1 g(精確至0.0001 g)樣品于25mL具塞比色管中,加人10 mL0.05mol/L鹽酸浴液,蓋上玻璃塞,渦旋混勻,置于80℃水浴中水解40 min,在水浴過程中每5 min振蕩一次,取出離心管,冷卻至室溫。將水解液轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶,用適量水洗滌離心管兩次并轉(zhuǎn)移至容量瓶中,用0.1%磷酸溶液-乙睛(4+6)定容至刻度,混勻。移取2 mL于離心管中,15000 r/min離心3 min,取上清液過0.22μm微孔濾膜后,待測。

1.4 分析條件

1.4.1色譜柱:ShimNex WP SAX(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01237-07)

流速:1mL/min

進(jìn)樣量:10μL

柱溫:30℃

檢測器:205nm

流動(dòng)相:A:0.1%磷酸溶液B:乙腈

A:B=40:60


1.4.2色譜柱:ShimNex HE SAX(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01245-37)

流速:1mL/min

進(jìn)樣量:10μL

柱溫:30℃

檢測器:205nm

流動(dòng)相:A:0.1%磷酸溶液B:乙腈

A:B=80:20


實(shí)驗(yàn)部分

2.1 按照上述色譜條件(1.4.1)進(jìn)行采集,色譜圖如下:

圖片
圖片
圖片

2.2 按照上述色譜條件(1.4.2)進(jìn)行采集,色譜圖如下:

圖片
圖片
圖片

實(shí)驗(yàn)結(jié)果




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