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如何對紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)工作
紫外可見分光光度計(jì)是一種用于測量物質(zhì)對紫外和可見光吸收光譜的精密儀器，其校準(zhǔn)方式對于確保測量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性至關(guān)重要。以下是對其校準(zhǔn)方式的詳細(xì)描述：
一、波長校準(zhǔn)
1. 使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：常用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括苯蒸氣、鐠釹玻璃等。苯蒸氣在紫外區(qū)有明顯的吸收峰，可用于校準(zhǔn)紫外區(qū)的波長；而鐠釹玻璃則在可見區(qū)有多個(gè)尖銳的吸收峰，適用于可見區(qū)的波長校準(zhǔn)。通過與已知波長的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)吸收峰進(jìn)行對比，可以校準(zhǔn)儀器的波長準(zhǔn)確性。
2. 汞燈校準(zhǔn)：汞燈是另一種常用的波長校準(zhǔn)工具。汞燈在特定波長下會(huì)發(fā)射出強(qiáng)烈的光，如253.7nm、365nm等。通過調(diào)整儀器，使測得的汞燈光譜線與已知波長相符，從而完成波長校準(zhǔn)。
二、光度校準(zhǔn)
1. 吸光度校準(zhǔn)：吸光度校準(zhǔn)是通過測量已知吸光度的標(biāo)準(zhǔn)溶液來檢查和調(diào)整儀器的吸光度準(zhǔn)確性。常用的標(biāo)準(zhǔn)溶液包括硫酸銅、重鉻酸鉀等，這些溶液在不同波長下的吸光度值是已知的。通過測量這些標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，并與已知值進(jìn)行對比，可以校準(zhǔn)儀器的吸光度準(zhǔn)確性。
2. 百分透光率校準(zhǔn)：百分透光率校準(zhǔn)是通過測量已知百分透光率的標(biāo)準(zhǔn)溶液(如蒸餾水)來確定儀器的百分透光率準(zhǔn)確性。蒸餾水在紫外和可見區(qū)幾乎不吸收光，其百分透光率接近100%。通過測量蒸餾水的百分透光率，并與理論值進(jìn)行對比，可以校準(zhǔn)儀器的百分透光率準(zhǔn)確性。
三、性能校準(zhǔn)
1. 雜散光檢查：雜散光是指儀器中除正常光束外的其他散射光，它會(huì)對測量結(jié)果產(chǎn)生干擾。通過測量無樣品時(shí)的光束強(qiáng)度和有樣品時(shí)的光束強(qiáng)度，可以計(jì)算出雜散光的大小。如果雜散光超過一定限度，則需要對儀器進(jìn)行調(diào)整或維修。
2. 穩(wěn)定性檢查：穩(wěn)定性檢查是為了評估儀器在長時(shí)間使用過程中的性能穩(wěn)定性。通過連續(xù)測量同一樣品多次，并觀察測量結(jié)果的變化情況，可以評估儀器的穩(wěn)定性。如果測量結(jié)果變化較大，則需要對儀器進(jìn)行檢查或維修。
紫外可見分光光度計(jì)的校準(zhǔn)方式包括波長校準(zhǔn)、光度校準(zhǔn)和性能校準(zhǔn)等多個(gè)方面。通過定期進(jìn)行校準(zhǔn)操作，可以確保儀器的準(zhǔn)確性和可靠性，從而獲得準(zhǔn)確可靠的測量結(jié)果。