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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
詳細(xì)介紹
口蹄疫病毒O型檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品名稱】
通用名稱：口蹄疫病毒O型檢測(cè)試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）
英文名稱：Foot and Mouth Disease Virus（serotype O）Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包裝規(guī)格】 25T/盒 & 50T/盒
【預(yù)期用途】
口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus，FMDV) 屬于小RNA病毒科，口蹄疫病毒屬，主要侵害偶蹄獸，有O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia-I七個(gè)血清型?？谔阋甙l(fā)病以發(fā)熱、口腔黏膜及蹄部和乳房皮膚發(fā)生水泡和潰爛為特征，是獸疫局規(guī)定的A類傳染病，易通過空氣傳播，傳染性強(qiáng)，流行迅速，偶爾感染人。由于口蹄疫傳播迅速、難于防治、補(bǔ)救措施少，被稱為畜牧業(yè)的“*殺手”。
本試劑盒利用實(shí)時(shí)熒光PCR原理，定性檢測(cè)口蹄疫O型病毒（FMDV-O)，對(duì)FMDV-O引起的偶蹄獸類病的診斷和監(jiān)控具有重要指導(dǎo)意義。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒針對(duì)口蹄疫病毒O型的高度保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物和探針，在反應(yīng)體系中含口蹄疫病毒O型基因組模板的情況下，PCR反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號(hào)。利用熒光定量PCR儀對(duì)PCR過程中相應(yīng)通道信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和輸出，實(shí)現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果的定性分析。
【主要組成成份】
序號(hào) | 組成 | 25T/盒 | 50T/盒 |
1 | FMDV-O RT-PCR反應(yīng)液 | 375 μL×1管 | 750 μL×1管 |
2 | FMDV-O逆轉(zhuǎn)錄酶 | 50 μL×1管 | 100 μL×1管 |
3 | FMDV-O Taq酶 | 75 μL×1管 | 150 μL×1管 |
4 | FMDV-O陽性對(duì)照 | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
5 | FMDV-O陰性對(duì)照 | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
6 | 說明書 | 1份 | 1份 |
注：陰性對(duì)照為偶蹄獸類基因組DNA，陽性對(duì)照為失去活性的FMDV-O病毒cDNA。
【儲(chǔ)存條件及有效期】避光-20℃以下保存，避免反復(fù)凍融，有效期12個(gè)月。
【適用儀器】ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列 、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。
【樣本要求】
新鮮采集的咽拭子、皰疹液和糞便標(biāo)本，并使用滅菌生理鹽水懸浮。
2.應(yīng)避免標(biāo)本間交叉污染。
3.標(biāo)本收集后可立即檢測(cè)；若不能立即檢測(cè)，可置于2～8℃冷藏過夜保存；如需長期保存，標(biāo)本應(yīng)凍存于-80℃以下，避免反復(fù)凍融。
【檢驗(yàn)方法】
1. 試劑準(zhǔn)備（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
（1）從冰箱中取出試劑盒, 從試劑盒中取出實(shí)驗(yàn)所需試劑,充分融化混勻并瞬時(shí)離心以去除管壁附著液體。
（2）核算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需要的反應(yīng)數(shù)（n），并根據(jù)如下表所示反應(yīng)體系計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需要的各種試劑量。
n =陰性對(duì)照數(shù)（1T）+陽性對(duì)照數(shù)（1T）+誤差預(yù)留量（1T）+樣本數(shù)
單反液配制表(每份) | RT-PCR反應(yīng)液 | 15.0 μL |
逆轉(zhuǎn)錄酶 | 2.0 μL | |
Taq酶 | 3.0 μL |
(3)在無菌離心管中加入上述試劑，充分混勻后瞬時(shí)離心。按照20 μL/管分裝量將試劑分裝至PCR反應(yīng)管。
2.樣本準(zhǔn)備（樣本處理區(qū)）