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兩種粒徑免疫比濁微球提高靈敏度和線性范圍的原理

時間:2023/11/16閱讀:516
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免疫比濁法是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合反應(yīng)的定量免疫分析方法。將待測抗原樣品與其對應(yīng)的抗體在適當條件下混合反應(yīng),抗原與抗體結(jié)合形成沉淀,使反應(yīng)溶液濁度增加,通過測定溶液濁度的變化來定量分析抗原。使用兩種不同粒徑的免疫比濁微球聯(lián)合用于免疫比濁技術(shù),通過優(yōu)化各實驗條件可以有效提高方法的靈敏度、準確度和線性范圍。在研發(fā)聯(lián)用兩種微球的免疫比濁方法時,需要考慮不同微球在性質(zhì)、修飾和免疫反應(yīng)條件上的差異,選擇最佳的條件使兩種微球發(fā)揮最大的優(yōu)勢,同時也要防止兩種微球在檢測中的相互影響。


產(chǎn)品參數(shù):

粒徑基團均一性(C.V%)固含量1mL
70nmCOOH3%10.0%90.00
80nmCOOH3%10.0%90.00
100nmCOOH3%10.0%90.00
105nmCOOH3%10.0%90.00
120nmCOOH3%10.0%90.00
130nmCOOH3%10.0%90.00
150nmCOOH3%10.0%90.00
170nmCOOH3%10.0%90.00
190nmCOOH3%10.0%90.00
195nmCOOH3%10.0%90.00
200nmCOOH3%10.0%90.00
240nmCOOH3%10.0%90.00

可給工業(yè)客戶贈送樣品,提供10ml/100ml/1l/5L/10L等大規(guī)格,歡迎咨詢。


產(chǎn)品特點:

 羧基分布更加均勻,羧基手臂鏈更長

 微球表面極度親水,大大降低非特異吸附

 徹(空格)底免清洗,可拿來超聲后直接偶聯(lián)

 批生產(chǎn)能力100L,性能穩(wěn)定,批間差小,有效期可達5年以上

 可接受客戶定制和項目外包合作,幫助企業(yè)實現(xiàn)原料自主化

 更高的靈敏度和更寬的線性范圍

可提供整體解決方案


產(chǎn)品參數(shù):

 材質(zhì):聚苯乙烯

 尺寸:50nm-500nm

 折射率:1.59(589nm波長,25℃)

 密度:1.05g/cm3

 分散介質(zhì):純水(含有少量表面活性劑和防腐劑)

 基團密度:50-286μeq/g(可定制)

 儲存條件:2-30℃ 保存,切勿凍融


免疫比濁法靈敏度和線性范圍主要受以下幾個因素的影響

1. 抗原濃度

抗原的種類和濃度直接決定了比濁反應(yīng)的強度,抗原濃度越高,反應(yīng)強度越大,檢測靈敏度越高。但過高的抗原濃度也會導(dǎo)致檢測系統(tǒng)飽和,失去線性關(guān)系。

2. 抗體濃度

一定濃度范圍內(nèi),抗體濃度越高,與抗原的結(jié)合機會越多,沉淀強度越大,檢測靈敏度越高。但過量的抗體也會產(chǎn)生抗體自身聚合的非特異反應(yīng),影響線性范圍。

3. 抗體親和力

親和力越高的抗體,與抗原的結(jié)合程度越強,產(chǎn)生的比濁信號也越強,檢測靈敏度越高。高親和力抗體也常用于提高檢測線性范圍。

4. 抗體種類

單克隆抗體與多克隆抗體相比,其與抗原的特異性結(jié)合更強,產(chǎn)生的比濁信號更大,檢測靈敏度更高。但線性范圍較小。聚缺口抗體可提高線性范圍。

5. 試劑稀釋倍數(shù)

在一定范圍內(nèi),試劑倍數(shù)越高,反應(yīng)物濃度越大,檢測靈敏度越高。但過高會超出線性范圍,產(chǎn)生 Hook 效應(yīng)。

6. 反應(yīng)時間

適當延長反應(yīng)時間,有利于抗原與抗體之間的結(jié)合,增強比濁信號,提高檢測靈敏度。但過長時間也會超出線性范圍。

7. 反應(yīng)溫度

在一定范圍內(nèi),溫度升高有利于抗原與抗體結(jié)合,提高檢測靈敏度。但過高溫度會使酶或熒光標記物不穩(wěn)定,縮小線性范圍。


兩種不同粒徑免疫比濁微球有效提高靈敏度和線性范圍的技術(shù)原理

1. 不同粒徑的微球具有不同的比表面積,小粒徑微球的比表面積更大,有利于生物識別分子的吸附或偶聯(lián),可以提高微球與目標分析物的結(jié)合效率,從而提高方法的靈敏度。

2. 不同粒徑微球阻礙光線通過的程度不同,小粒徑微球?qū)饩€的阻礙更小,有利于在低濃度下產(chǎn)生可檢測的吸光度變化,有利于提高檢出限和下限。

3. 不同粒徑微球在免疫反應(yīng)中的沉降速率不同,小粒徑微球的沉降速率更慢,有利于免疫反應(yīng)的進行,獲得更高的結(jié)合效率,提高靈敏度。

4. 不同粒徑微球可與不同濃度范圍的目標分析物產(chǎn)生最佳的免疫反應(yīng),小粒徑微球與低濃度分析物,大粒徑微球與高濃度分析物的結(jié)合效果更佳。所以聯(lián)用可擴展方法的線性范圍。

5. 分別使用不同粒徑微球可以分別建立其對應(yīng)的標準曲線,在一定濃度范圍內(nèi)選擇最佳的標準曲線進行樣品的定量分析,提高結(jié)果的準確度。

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