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大鼠腎足蛋白(NPHN) ELISA試劑盒詳細(xì)介紹:
[規(guī)格]:48T/96T
品牌:瑞番
[檢測波長]:450nm
[保存條件]:2-8°,六個(gè)月
[產(chǎn)品用途]:僅供科研使用
[檢測目的]:用于測定血清,血漿,胸腹水等相關(guān)液體標(biāo)本
[特點(diǎn)]:敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
瑞番供應(yīng)的種屬有:人,雞,鴨,魚,馬,兔 豬,植物等ELISA試劑盒等等
[標(biāo)本處理]:
1. 本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
2. 實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高,應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
3. 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性,并注意留存樣本。
4. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
5. 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測不出的情況。
6. 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
7. 建議使用新鮮樣本,保存時(shí)間過長可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
[操作步驟]:
1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復(fù)5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
[大鼠腎足蛋白(NPHN) ELISA試劑盒問題解答]:
若實(shí)驗(yàn)效果不好,請及時(shí)對顯色結(jié)果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時(shí)您也可以參考以下資料:
問題如下 | 可能原因 | 解決方案 |
1:標(biāo)準(zhǔn)曲線差? | 1吸取及洗滌不充分 2移液不精準(zhǔn)
| 1充分的吸取及洗滌 2檢查和校正移液器 |
2:精密度低? | 1洗滌不充分 2混勻不充分和吸取試劑不足 3重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜 加樣不精確 | 1充分混勻和吸取試劑 2使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜 3檢查和校正移液器
|
3:OD值低? | 1溫育時(shí)間不正確 2溫育溫度不正確 3酶標(biāo)記物或底物失效 4沒有加入終止液 5超出讀數(shù)時(shí)間讀數(shù) | 1保證充足的溫育時(shí)間 2試劑要平衡至室溫并保證的溫育溫度 3通過混合酶標(biāo)記物和底物,顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查 4按照說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟加入終止液 5在說明書推薦的讀數(shù)時(shí)間內(nèi)讀數(shù) |
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